反應(yīng)五要素：
問號(hào)鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應(yīng)流程：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

使用方法 ：   

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機(jī)

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng)：   

5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個(gè)檢測過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行，以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí)，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時(shí)禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增，以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

人Podocin ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：0.98Venlafaxine Hydrochloride

人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格：0.99Vecuronium Bromide

人PL12抗體/抗酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格：0.98Vanillin

人P53(P53)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：98%,BR,一水物Valsartan

人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRValrubicin Resolution Mixture

人OJ抗體/抗異亮酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRValrubicin

人N-乙?；?絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRValproic Acid

人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：0.98Valganciclovir Hydrochloride

淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

雪白根霉厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

293T(人胚腎細(xì)胞)日本根霉 Rhizopus japonicus

大麗輪枝菌 Verticillium dahliea Kleb人成纖維細(xì)胞

根瘤菌球毛殼 Chaetomium globosum

負(fù)鼠腎細(xì)胞香菇 Lentinula edodes

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

植物桿菌 Lactobacillus plantarum喜鹽芽胞桿菌 Halobacillus sp.

黑化大家鼠肺成纖維樣細(xì)胞綠色木霉 Trichoderma viride

小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基ACCC40177 Nocardiopsis dassonvillei

大鼠腸上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基日本根霉 Rhizopus japonicus

NCI-H1703(人肺鱗細(xì)胞)MFC(小鼠胃細(xì)胞)

燕麥鐮刀菌 Gibberella avenacea球型芽孢桿菌 Bacillus sphaerious
問號(hào)鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒IFNA21/IFNA F  干擾素α21抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit特價(jià)促銷

IFNAR2/IFNABR  干擾素α受體2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Argyrophilic nucleolar organizer region proteins,Ag-NORs ELISA Kit特價(jià)促銷

IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11  干擾素α11抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Ribonuclease,RNASE ELISA Kit進(jìn)口/分裝

IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C  干擾素α10抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Melanoma Marker A,MART/Melan-A ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

Otoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein  纖維細(xì)胞源性蛋白規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)

HSP10/CPN10  熱休克蛋白10抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human melanocyte stimulating hormone,MSH ELISA Kit特價(jià)促銷

ANGPTL6  生成素相關(guān)蛋白6抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human melanocyte antibody,MC Ab ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

RCAN2/DSCR1L1  鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白2抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1）規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor,MLZE ELISA Kit特價(jià)促銷