準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應(yīng)流程：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

反應(yīng)五要素：

乳酸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

使用方法 ：   

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機(jī)

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項：   

5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行，以避免交叉污染。 5.3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增，以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng),三水合物Pimpinellin

人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,VEGFR2選擇性抑制劑Nepetin-7-glucoside

人白三E4(LTE4)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGeniposide

人白三D4(LTD4)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Secoisolariciresinol

人白三C4(LTC4)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRGeraniin

人白三B4(LTB4) ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>97%wilforine

人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒  質(zhì)量規(guī)格：>85%,美國進(jìn)口wilfordine

人白介素9(IL-9)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分Celastrol (Tripterin, Tripterine)

大鼠氣管和上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

大鼠肺大平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

TSN瓊脂/胰蛋白胨亞鹽新霉素瓊脂/胰酪胨亞鹽新霉素瓊脂/胰酶亞鹽新霉素瓊脂/TSN Agar用于梭菌的檢測250克國產(chǎn)/進(jìn)口

胰蛋白胨大豆肉湯/胰酪胨大豆肉湯/胰酶大豆肉湯/CASO 肉湯/TSB一種通用的微生物營養(yǎng)增菌肉湯，也可用于金黃色葡萄球菌的MPN測定和藥品生產(chǎn)線無菌灌裝試驗250克國產(chǎn)/進(jìn)口

人結(jié)直腸腺細(xì)胞英文名稱：Caco-2

Caco-2(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

激肽釋放酶8(KLK8)重組蛋白英文名稱：Recombinant Kallikrein 8 (KLK8)

桿菌瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于維生素檢測菌種的培養(yǎng)基

大鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

北沙參亞碲鈉胨水培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Beisachang Sodium Tellurite Broth Base用于金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)，每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲鈉0.2ml250克國產(chǎn)/進(jìn)口

制霉菌素檢定培養(yǎng)基/Nystatin Medium250克國產(chǎn)/進(jìn)口

U14(小鼠子宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人食管細(xì)胞英文名稱：KYSE30
乳酸桿菌屬通用PCR檢測試劑盒TSSC3  抑制轉(zhuǎn)移候選基因3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

TTI1  轉(zhuǎn)錄因子相互作用蛋白1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human catecholamine，CA ELISA Kit特價供應(yīng)

WDR61  WD重復(fù)膜蛋白61抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human diamine oxidase,DAO ELISA Kit 進(jìn)口/原裝

RBR2/Rb2 p130  視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC ELISA Kit特價供應(yīng)

BRCC3/BRCC36  癌易感基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polypeptide B4,UGT2B4 ELISA Kit特價供應(yīng)

Casein Kappa/CSN3/COPS3  K-酪蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Adenosine diphosphate，ADP ELISA Kit特價促銷

CXXC5  二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：human dihydropyrimidinase-like 2,DPYSL2 ELISA Kit進(jìn)口/原裝

DMTF1  周期素D相互作用蛋白1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：human dihydropyrimidinase-like 3,DPYSL3 ELISA Kit特價促銷