準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應(yīng)流程：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

反應(yīng)五要素：

擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子*很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

使用方法 ：   

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項：   

5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應(yīng)分區(qū)域進行，以避免交叉污染。 5.3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。

5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Nandrolone Phenpropionate CIII

大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNandrolone Decanoate CIII

大鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98,標(biāo)準(zhǔn)品Nandrolone CIII

大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRNaltrexone

大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRNaloxone

大鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRNalorphine Hydrochloride CIII

大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98,標(biāo)準(zhǔn)品Nalidixic Acid

大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNaftifine Hydrochloride

卵巢英文名稱：CoC2（懸?。?/span>

CNE(人鼻咽細胞)5×106cells/瓶×2

間隙連接蛋白43(CX43)重組蛋白英文名稱：Recombinant Connexin 43 (CX43)

Bolton肉湯配套試劑 規(guī)格： 10支/盒 用途： 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎(chǔ)中

大鼠大隱靜脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL

XM-G瓊脂培養(yǎng)基/XM-G Agar300克日本Nissui原裝

營養(yǎng)肉湯/普通肉湯培養(yǎng)基/NB一般細菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

人高轉(zhuǎn)移肺細胞英文名稱：95-D

B16(小鼠黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2

基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)

3%鈉堿性蛋白胨水 規(guī)格： 250g 用途： 用于副溶血性弧菌增菌培養(yǎng)。

甘露卵黃多粘菌素瓊脂平板（MYP） 規(guī)格： 90mmX20個 用途： 用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和...

動力—硝鹽培養(yǎng)基(A法) 規(guī)格： 250g 用途： 用于鑒別細菌動力和硝鹽還原試驗(GB/T 8538-2008，GB/T4789.28－2003中4.72 ，GB/T4789.14－20...
擠奶工結(jié)節(jié)病毒PCR檢測試劑盒

"英文名稱：Hoechst 33258 Staining Solution

產(chǎn)品規(guī)格：10ml|50ml

發(fā)貨周期：1～3天

本Hoechst 33258染色液可直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，也可直接用于活細胞或組織的細胞核染色。Hoechst 33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。

Hoechst 33258染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也常用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。

Hoechst 33258的*激發(fā)波長為346nm，*發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，*激發(fā)波長為352nm，*發(fā)射波長為461nm。

CAS：23491-45-4

分子式：C25H24N6O·3HCl

分子量：533.88

儲存條件：-20℃避光，有效期一年。

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