組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測(cè)試劑盒 | Mecistocirrus digitatusPCR | 50T |
普通PCR反應(yīng)流程:

準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用方法 :
1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機(jī)
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項(xiàng):
牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測(cè)試劑盒5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說明書全文。
5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽(yáng)性;整個(gè)檢測(cè)過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時(shí)禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。
5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。
大鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BS級(jí),干品含量>50%Pirbuterol Acetate (AS)
大鼠胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BSPiperidolate Hydrochloride
大鼠胃標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Phosphate
大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BS Dihydrochloride
大鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:85%,BS Citrate
大鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Adipate
大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BS
大鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:用于生化研究,進(jìn)口Piperacillin
酵母粉葡萄糖霉素瓊脂/YGC瓊脂/YGC Agar食品中霉素及酵母菌總數(shù)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
PATU8988(人*細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
小鼠腎成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
布氏瓊脂/Brucella Agar彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗(yàn)和純培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
AsPC-1(人*細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
M-H瓊脂平板/M-H Agar Plate10塊國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
X線暗盒個(gè)國(guó)產(chǎn)
LLC(小鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠氣管和上細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
人胎盤絨毛細(xì)胞英文名稱:JAR
人大細(xì)胞肺細(xì)胞英文名稱:NCI-H661
大鼠大隱內(nèi)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
Relaxin 1 松弛肽/松弛素抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human soluble P-selectin,sP-selectin ELISA Kit進(jìn)口/原裝
Renalase 腎胺酶抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G ELISA Kit特價(jià)促銷
SLC12A3/NCCT 鈉氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:human lectin-galactose binding-soluble 3,Lgals3 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
VNN1 非分子1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit特價(jià)促銷
AXUD1 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1)規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1 ELISA Kit特價(jià)促銷
BS69/Adenovirus 5 E1A binding protein 腺病毒5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1)規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
BTG3 高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human soluble myosin heavy chain 1,sMHC-1 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
BTG4 B細(xì)胞遷移基因4抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISA Kit特價(jià)促銷
反應(yīng)五要素:
牛捻轉(zhuǎn)胃蟲PCR檢測(cè)試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。