巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒
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上海一研生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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用途范圍 僅用于科研
純度 98%%
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 上海一研
規(guī)格 50T
貨號 EY00P944
是否進(jìn)口
商品介紹

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

            產(chǎn)品名稱

               英文名稱

                規(guī)格

巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒

Pasteurella spp.PCR

                  50T

普通PCR反應(yīng)流程:

 

準(zhǔn)備物品:

清理液(A)                                   毫升

染色液(t B)                                   微升

稀釋液(C)                                   毫升

溶解液(tD)                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

使用方法    

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1)PCR儀

2)PCR反應(yīng)管

3)電泳儀及水平電泳槽

4)高速離心機(jī)

5)微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1)瓊脂糖

2)EB(溴化乙錠)

3)去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng):   

巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

松苓新 訂購|咨詢 TOXO IgM  弓形蟲抗體 IgM(間接法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

人參皂苷 Rg5 訂購|咨詢 TOXO IgM  弓形蟲抗體 IgM(捕獲法一步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

3-羥基-9,10-二氧基紫檀;美迪 訂購|咨詢 TOXO IgM  弓形蟲抗體 IgM(捕獲法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

Milataxel 訂購|咨詢 HSV- I IgG  單純Ⅰ型病毒 IgG(間接法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

漢防己素訂購|HSV- I IgM  單純Ⅰ型病毒 IgM(間接法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

魚藤素 訂購|咨詢 HSV- I IgM  單純Ⅰ型病毒 IgM(捕獲法一步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

雅姆皂苷元 訂購|咨詢 HSV- I IgM  單純Ⅰ型病毒 IgM(捕獲法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

烏藥環(huán) 訂購|咨詢 HSV- II IgG  單純Ⅱ型病毒 IgG(間接法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

1,3,5,8-四羥基山 訂購|咨詢 HSV- II IgM  單純Ⅱ型病毒 IgM(間接法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

芹糖異甘草苷 訂購|咨詢 HSV- II IgM  單純Ⅱ型病毒 IgM (捕獲法,一步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

尿 訂購|咨詢 HSV- II IgM  單純Ⅱ型病毒 IgM (捕獲法,二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg

龍血素C 訂購|咨詢 Anti-Ins  抗體(間接法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

3-O-基沒食子 訂購|咨詢 Anti-GAD  谷脫羧酶抗體(間接法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

狗牙花堿D乙 訂購|咨詢 Ins  (間接法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

當(dāng)藥寧 訂購|咨詢 C-Peptide  C-肽(夾心法二步法) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

(-)-白雀木 訂購|咨詢   破抗體(雙抗原夾心法) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg

大豆皂苷Aa 訂購|咨詢   包蟲抗體IgG(間接法二步法) 規(guī)格: ;10mg

訂購|咨詢 DAO(Rat diamine oxidase,DAO) ELISA Kit  大鼠二氧酶 規(guī)格: HPLC≥95%;0.2ml
TXNDC9  胚胎干細(xì)胞相關(guān)蛋白TXNDC9抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Aquaporin 3,AQP-3 ELISA Kit進(jìn)口/原裝

HSPB7/cvHSP  熱休克蛋白β7抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Aquaporin 4,AQP-4 ELISA Kit進(jìn)口/分裝

KCTD5  鉀離子通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse Aquaporin 5,AQP-5 ELISA Kit特價供應(yīng)

GERP/TRIM8/RNF27  環(huán)指蛋白27抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit進(jìn)口/原裝

FIGNL1  FIGNL1蛋白抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse myeloperoxidase,MPO ELISA Kit進(jìn)口/原裝

APC70/CRSP70  轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA Kit特價促銷

PAP-α/β/γ  多聚合酶α/β/γ抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse myelin basic protein,MBP ELISA Kit進(jìn)口/分裝

Geminin  DNA復(fù)制抑制因子抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱:Mouse carbonic anhydrase,CA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
反應(yīng)五要素:

巴斯德氏桿菌屬通用PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

 


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