α1抗胰蛋白酶ELISA試劑盒
α1抗胰蛋白酶ELISA試劑盒
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上海一研生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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數(shù)量 38
用途范圍 僅用于科研
純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書%
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 一研
規(guī)格 48T/96T
標(biāo)記物 酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
樣本 α1-Antitrypsin
檢測(cè)方法 酶聯(lián)免疫吸附法
應(yīng)用 雙抗夾心法
檢測(cè)限 血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,組織勻漿等
貨號(hào) EY2224
是否進(jìn)口
商品介紹

試劑盒性能:
產(chǎn)品名稱:α1抗胰蛋白酶ELISA試劑盒
英文名稱:α1-Antitrypsin

檢測(cè)范圍:125μg/mL~4000μg/mL。

靈敏度:10。

特異性:產(chǎn)品僅用于科研不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。


組成:

1:預(yù)包被板: 96T/48T

2:酶標(biāo)記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1

3:標(biāo)準(zhǔn)品: -6 0.5mL x 2 

4:EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5:標(biāo)記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6:顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

7:終止液: 1N硫酸 12mL x 1

8:濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1

操作流程如下

1)α1抗胰蛋白酶ELISA試劑盒待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。

2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。

3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,產(chǎn)品僅用于科研用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。

6)洗板,同(4)。

7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。

9)洗板,同(4)。

10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

Mouse β-catenin, β-cat Elisa Kit谷胱甘肽(還原型)Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:96T

Mouse CTX-2 Elisa KitL-谷胱甘肽(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:48T

Mouse CTX-2 Elisa Kit谷胱甘肽(氧化型)Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:96T

Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide, PACAP Elisa Kit DL-異亮氨酸Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:48T

Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide, PACAP Elisa Kit L-賴氨酸鹽酸鹽Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:96T

Mouse Angiotensin converting enzyme, ACE Elisa KitL-鳥氨酸鹽酸鹽Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:48T

Mouse Angiotensin converting enzyme, ACE Elisa KitL-天門冬氨酸Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:96T

Mouse angiotension Ⅱ, ANG-Ⅱ Elisa KitL-天門冬氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:48T

Mouse angiotension Ⅱ, ANG-Ⅱ Elisa KitL-半胱胺酸鹽酸鹽無(wú)水物Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:96T

Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin, KAF/AR Elisa Kit羧甲司坦;S-羧甲基-L-半胱氨酸Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:48T

Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin, KAF/AR Elisa KitS-芐基-L-半胱氨酸Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:96T

Mouse Activin A, ACV-A Elisa KitL-谷氨酸鹽酸鹽Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:48T

Mouse Activin A, ACV-A Elisa KitN'-硝基-L-精氨酸(L-NNA)Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:96T

Mouse Brain derived neurotrophic facor, BDNF Elisa KitNα-苯甲酰-L-精氨酸Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:48T

Mouse Brain derived neurotrophic facor, BDNF Elisa KitL-天冬酰胺,無(wú)水物(標(biāo)準(zhǔn)品)Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:96T

Mouse Bone morphogenetic protein 2, BMP-2 Elisa KitL-天冬素/L-天冬酰胺Mouse/小鼠elisa試劑盒  規(guī)格:48T
α1抗胰蛋白酶ELISA試劑盒

"英文名稱:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格:50次

發(fā)貨周期:1~3天

本試劑盒是一種采用Annexin V-FITC與PI雙染法進(jìn)行細(xì)胞早期凋亡分析的檢測(cè)試劑盒。

細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面,這些細(xì)胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸(PS)從細(xì)胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外,使PS暴露在細(xì)胞膜外表面。PS是一種帶負(fù)電荷的磷脂,正常主要存在于細(xì)胞膜的內(nèi)面,在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)細(xì)胞膜上的這種磷脂分布的不對(duì)稱性被破壞而使PS暴露在細(xì)胞膜外。Annexin V具有易于結(jié)合到磷脂類如PS的特性,對(duì)PS有高度的親和性。因此,該蛋白可充當(dāng)一敏感的探針檢測(cè)暴露在細(xì)胞膜表面的PS。PS轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所獨(dú)特的,也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的,而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就被破壞。另外一種活細(xì)胞非透過(guò)性熒光染料碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)不能通過(guò)完整的活細(xì)胞,但能夠?qū)乃篮偷蛲鐾砥诘募?xì)胞進(jìn)行染色, 因此通常將Annexin V與PI配合染色, 以區(qū)別凋亡早期細(xì)胞與壞死細(xì)胞和凋亡的晚期細(xì)胞。

操作步驟:

1、細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:

a.對(duì)于貼壁細(xì)胞:小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用胰酶消化細(xì)胞,至細(xì)胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來(lái)時(shí),加入前面收集的細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下所有的貼壁細(xì)胞,并輕輕吹散細(xì)胞。再次收集到離心管內(nèi)。1000×g左右離心3-5分鐘,沉淀細(xì)胞。對(duì)于特定的細(xì)胞,如果細(xì)胞沉淀不充分,可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間或稍稍加大離心力。小心吸除上清,可以殘留約50μl左右的培養(yǎng)液,以避免吸走細(xì)胞。加入約1ml 4℃預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,再次離心沉淀細(xì)胞,小心吸除上清。再次加入1ml 4℃預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,再次離心沉淀細(xì)胞。

b.對(duì)于懸浮細(xì)胞:1000×g左右離心3-5分鐘,沉淀細(xì)胞。對(duì)于特定的細(xì)胞,如果細(xì)胞沉淀不充分,可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間或稍稍加大離心力。小心吸除上清,可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液,以避免吸走細(xì)胞。加入約1ml 4℃預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細(xì)胞,小心吸除上清,可以殘留約50μl左右的PBS,以避免吸走細(xì)胞。再次加入1ml 4℃預(yù)冷的PBS,重懸細(xì)胞,再次離心沉淀細(xì)胞。

2、用去離子水按 1:3 稀釋Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去離子水)。

3、用 250μl Binding Buffer重新懸浮細(xì)胞,調(diào)節(jié)其濃度為 1×106/ml。

4、取 100μl 的細(xì)胞懸液于 5ml 流式管中,加入 5μl Annexin V/FITC 和 10μl 20μg/ml的PI溶液。

5、混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘。

6、在反應(yīng)管中加 400μl PBS,流式細(xì)胞儀(FACS)分析。

儲(chǔ)存條件:2~8℃,避光保存"

我公司主營(yíng)如下:

    α1抗胰蛋白酶ELISA試劑盒試劑盒:大鼠Elisa試劑盒,小鼠Elisa試劑盒,人Elisa試劑盒,犬Elisa試劑盒,魚Elisa試劑盒,雞Elisa試劑盒,牛Elisa試劑盒、其他動(dòng)物類Elisa試劑盒、植物Elisa試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、 免疫組化試劑盒、金標(biāo)檢測(cè)試劑盒、生化試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒產(chǎn)品僅用于科研。

     抗體:一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單*抗體、多*抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。抗體:一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單*抗體、多*抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體;免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。

     動(dòng)物血清:內(nèi)皮細(xì)胞專用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。動(dòng)物血清:內(nèi)皮細(xì)胞專用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。

     細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、細(xì)胞、耐藥細(xì)胞。細(xì)胞:原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、細(xì)胞、耐藥細(xì)胞。


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