植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系說(shuō)明書(shū)價(jià)格優(yōu)惠

快速的從植物（如：水稻、小麥、煙草、玉米、大豆、油菜、棉花等）的種子樣本中釋放出基因組 DNA，直接用于 PCR 反應(yīng)，并采用UNG防PCR產(chǎn)物污染體系，因此特別適合大規(guī)?；驒z測(cè)。? 無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)而昂貴的 DNA 純化。

樣品需求量小，只需取單粒種子即可。

 無(wú)需研磨、破碎等特殊處理，操作簡(jiǎn)便。

防污染 PCR 體系 2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)，有效消除由 PCR 產(chǎn)物所引起的污染，保證擴(kuò)增的

   特異性和準(zhǔn)確性。

植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系上海滬崢供應(yīng)

產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品采用獨(dú)特的裂解反應(yīng)體系，能夠快速的從植物（如：水稻、小麥、煙草、玉米、大豆、油菜、棉花等）的種子樣本中釋放出基因組 DNA，用于 PCR 反應(yīng)，因此特別適合大規(guī)?；驒z測(cè)。為了滿足不同檢測(cè)試驗(yàn)的需要，本試劑盒可以使用多種類型的樣本（如完整種子、微量組織切塊或多顆種子的磨碎樣本）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。其中，對(duì)于還需要進(jìn)行萌發(fā)的種子樣本，可以選擇切取種胚以外的微量組織切塊(1-5mg)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；對(duì)于需要在大量樣本中進(jìn)行抽樣檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)，可以選擇將多個(gè)樣本混合并磨碎成直徑0.5mm 左右的顆粒后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)（*可以檢測(cè)出

0.1%的目的樣本）。

裂解反應(yīng)體系釋放基因組 DNA 過(guò)程可以在 5-10min 內(nèi)完成，不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產(chǎn)物的過(guò)程，即可將釋放出的微量 DNA 作為模板進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。

2× Seed PCR EasyTM  Mix(UNG)在 2× Seed PCR EasyTM Mix 的基礎(chǔ)上用 dUTP 替代了 dTTP，并同時(shí)加入能夠降解含有 dUTP 模板的

UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR 反應(yīng)前，利用 UNG 酶降解含有尿嘧啶的 PCR 產(chǎn)物，UNG 酶對(duì)不含有尿嘧啶的模板不會(huì)造成任何影響，從而保證擴(kuò)增的特異性和準(zhǔn)確性，防止了大規(guī)?；驒z測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)的 PCR 產(chǎn)物污染問(wèn)題。

D-Taq DNA polymerase 是 Foregene 為直接PCR反應(yīng)專門(mén)研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase 對(duì)多種 PCR 反應(yīng)抑制劑具有極強(qiáng)的的耐受性、在各種復(fù)雜反應(yīng)體系中均能高效擴(kuò)增痕量的 DNA，擴(kuò)增速度可達(dá) 2Kb/min，特別適合進(jìn)行直接 PCR反應(yīng)。

植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系上海滬崢供應(yīng)

試劑盒內(nèi)容

Part I (Store at R.T. or 4°C)

 Buffer SP1：提供植物種子裂解反應(yīng)所需的環(huán)境。

 Buffer SP2：中和裂解產(chǎn)物，使其不影響后續(xù) PCR 反應(yīng)。

6× DNA Loading Buffer：該 Loading Buffer 中不含有 SDS。建議在進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，配搭使用試劑盒附贈(zèng)的

   6× DNA Loading Buffer，以便取得好的電泳結(jié)果。切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer，否則在電泳時(shí)會(huì)在泳時(shí)會(huì)在泳道中有一大團(tuán)拖尾

   亮光，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

Part II (Store at -20°C）

 2× Seed PCR EasyTM (UNG)：在 2× Seed PCR EasyTM Mix 的基礎(chǔ)上用 dUTP替代了 dTTP，并同時(shí)加入能夠降解含有 dUTP 模板的

   UNG 酶，從而能夠有效防止 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物污染。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系說(shuō)明書(shū)價(jià)格優(yōu)惠試劑盒應(yīng)用

適用范圍：多種植物種子。 裂解混合液：僅用作 PCR 模板。

 試劑盒可用于以下用途：轉(zhuǎn)基因種子鑒定、植物基因分型等。