上海烜雅生物科技有限公司
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主營產(chǎn)品: 從事生物科技, 醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務(wù), 技術(shù)開發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務(wù)咨詢(除經(jīng)紀(jì)), 電子商務(wù)(不得從事增值電信, 金融業(yè)務(wù)), 投資管理, 建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營), 化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品, 監(jiān)控化學(xué)品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學(xué)品), 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備, 測量器材, 酒店設(shè)備, 環(huán)保設(shè)備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
新孢子蟲(Ne)熒光PCR檢測試劑盒
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主營產(chǎn)品
從事生物科技, 醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務(wù), 技術(shù)開發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務(wù)咨詢(除經(jīng)紀(jì)), 電子商務(wù)(不得從事增值電信, 金融業(yè)務(wù)), 投資管理, 建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營), 化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品, 監(jiān)控化學(xué)品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學(xué)品), 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備, 測量器材, 酒店設(shè)備, 環(huán)保設(shè)備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:新孢子蟲(Ne)熒光PCR檢測試劑盒
【包裝規(guī)格】48T/盒
Name :New nucleic acid detection kit for new sporozoite (Ne) (PCR- fluorescent probe)
新孢子蟲(Ne)熒光PCR檢測試劑盒【預(yù)期用途】試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 | 反應(yīng)液 | 酶液 |
用量(樣本數(shù)為 N) | 20μL | 1μL |
將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,21uL/管。
加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);
設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL;
熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)
NONE,請勿選擇 ROX 參比熒光。
推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟 | 循環(huán)數(shù) | 溫度 | 時間 | 收集熒光信號 |
1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
2 | 40 cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
55℃ | 30sec | 是 |
結(jié)果分析判定
結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。
結(jié)果判斷
陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。
可疑:檢測通道 Ct 值>35.0,且出現(xiàn)明顯擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn),重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和明顯擴(kuò)增曲線者為陽性,否則為陰性。
陰性:樣本檢測結(jié)果無 Ct 值且無明顯的擴(kuò)增曲線。
檢測方法的局限性
樣本檢測結(jié)果不樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);
樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;
病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果。
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品:無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示;
陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應(yīng)同時滿足,否則實(shí)驗(yàn)視為無效。
【參考文獻(xiàn)】
國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.SN/T 1280-2003 國境口岸檢驗(yàn)規(guī)程[S].北京:科學(xué)出版社, 2003.
張志凱, 海榮, 蔡虹, 等. 耶爾森菌的多重 PCR 檢測方法[J]. 中國媒介生物學(xué)及控制雜志, 2007.
吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局. DB22/T 2081-2014 耶爾森菌核酸的測定-熒光PCR 方法[S].
新孢子蟲(Ne)熒光PCR檢測試劑盒【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個月。
【適用儀器】
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
【標(biāo)本采集】
患病動物:腺、肝、脾、肺組織、糞便、血液人:痰;尿液、血液
【保存和運(yùn)輸】
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
【產(chǎn)品圖片】
【生產(chǎn)企業(yè)】
企業(yè)名稱:上海烜雅生物科技有限公司
生產(chǎn)地址:金海公路3265號14幢11546室
上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的新孢子蟲(Ne)熒光PCR檢測試劑盒供應(yīng)質(zhì)量高,價格低,售后有保證。為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
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本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷。
新孢子蟲(Ne)熒光PCR檢測試劑盒熱銷產(chǎn)品:
豬病 XY-SD-D-1031 偽毒通用型(PRV-gB)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
豬病 XY-SD-D-1032 豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
豬病 XY-SD-D-1033 豬細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
豬病 XY-SD-D-1034 桿菌(SER)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
豬病 XY-SD-D-1035 豬多殺性巴氏桿菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
豬病 XY-SD-D-1036 弓形蟲(TOX)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
豬病 XY-SD-D-1037 豬支原體(MHP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
豬病 XY-SD-D-1038 副豬嗜血桿菌(HPS)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
豬病 XY-SD-D-1039 豬蛇形螺旋體(SH)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
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