【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：登革熱病毒4型(DFV-IV)熒光PCR檢測(cè)試劑盒

Name ：Dengue virus type 4 (DFV-IV) nucleic acid detection kit (RT-PCR fluorescence probe method)

【包裝規(guī)格】48T/盒

登登革熱病毒4型(DFV-IV)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測(cè)動(dòng)物腺、肝、脾、肺組織及人痰、血液等標(biāo)本中分離出的指標(biāo)，用于指標(biāo)的定量檢測(cè)輔助診斷。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采對(duì)指標(biāo)基因設(shè)計(jì)特異性的引物和探針，用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)指標(biāo)的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)，用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)診斷。

【試劑組成】

名 稱	規(guī) 格
核酸提取液	1.5mL×2 管
酶液	50μL×1 管
反應(yīng)液	1.0mL×1 管
陽性質(zhì)控品	50μL×1 管
陰性質(zhì)控品	250μL×1 管

說明：不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。

登革熱病毒4型(DFV-IV)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【使用方法】

樣品處理（樣本處理區(qū)）

樣本前處理

組織樣品：每份組織分別從 3 個(gè)不同的位置稱取樣品約 1g，手術(shù)剪剪碎混勻后取0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中，8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中；棉拭子取 100μL 進(jìn)行提取。

【標(biāo)本采集】

無菌注射器抽取血液 3~5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管；有神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的，動(dòng)物戒病人取腦脊液進(jìn)行檢測(cè)；疑似污染的食物取 1g 進(jìn)行檢測(cè)

【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但丌能超過 6 個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽性對(duì)照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑	反應(yīng)液	酶液
用量（樣本數(shù)為 N）	20μL	1μL

將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，21uL/管。

加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；

熒光通道選擇： 檢測(cè)通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）

NONE，請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光。

推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟	循環(huán)數(shù)	溫度	時(shí)間	收集熒光信號(hào)
1	1 cycle	95℃	10min	否
2	40 cycles	94℃	15sec	否
		55℃	30sec	是

結(jié)果分析判定

結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析，當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí)，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照)，重新分析結(jié)果。

結(jié)果判斷

陽性：檢測(cè)通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線。

可疑：檢測(cè)通道 Ct 值>35.0，且出現(xiàn)明顯擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn)，重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和明顯擴(kuò)增曲線者為陽性，否則為陰性。

登革熱病毒4型(DFV-IV)熒光PCR檢測(cè)試劑盒【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次，有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

【標(biāo)本采集】

患病動(dòng)物：腺、肝、脾、肺組織、糞便、血液人：痰；尿液、血液

【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過 6 個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

【產(chǎn)品圖片】

【生產(chǎn)企業(yè)】

企業(yè)名稱：上海烜雅生物科技有限公司

生產(chǎn)地址：金海公路3265號(hào)14幢11546室

上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的登革熱病毒4型(DFV-IV)熒光PCR檢測(cè)試劑盒質(zhì)量高，價(jià)格低，售后有保證。為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。

請(qǐng)直接向我司客服索取說明書

本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷。

登-革熱病毒4型(DFV-IV)熒光PCR檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品：

哺乳動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix    XY-TE-0998    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 1    XY-TE-0999    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 2    XY-TE-1000    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 3    XY-TE-1001    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 4    XY-TE-1002    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 5    XY-TE-1003    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 6    XY-TE-1004    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 7    XY-TE-1005    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 8    XY-TE-1006    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 9    XY-TE-1007    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 10    XY-TE-1008    100 次

植物種屬鑒定 PCR Mix 11    XY-TE-1009    100 次

轉(zhuǎn) ESPES 基因植物 PCR Mix    XY-TE-1010    100 次

轉(zhuǎn) ESPES-NOs 基因植物 PCR Mix    XY-TE-1011    100 次

轉(zhuǎn) Lectin 基因植物 PCR Mix    XY-TE-1012    100 次

真菌種屬鑒定 PCR Mix 1    XY-TE-1013    100 次

真菌種屬鑒定 PCR Mix 2    XY-TE-1014    100 次

真菌種屬鑒定 PCR Mix 3    XY-TE-1015    100 次

真菌種屬鑒定 PCR Mix 4    XY-TE-1016    100 次

真菌種屬鑒定 PCR Mix 5    XY-TE-1017    100 次