產(chǎn)品詳情

泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司，目前可提供各種抗體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、分子生物學(xué)試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù)，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。

睿信生物擁有完善的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì)，嚴(yán)格的技術(shù)服務(wù)流程，獲得客戶(hù)的一致好評(píng)。

 

我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測(cè)試劑盒，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。 

 

試劑盒限制性

1、 僅供科研使用，不得用于臨床診斷。

2、 在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用，過(guò)期產(chǎn)品不得使用。

3、 跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。

4、 使用試劑盒配套的樣品稀釋液。

5、 如果樣本值高于最高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值，請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后，再重新測(cè)定。

6、 待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果，檢測(cè)前，請(qǐng)排出該因素。

7、 通過(guò)其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果，與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。

 

技術(shù)提示

1、 混合蛋白溶液時(shí)，避免起泡。

2、 加校準(zhǔn)品與樣本時(shí)，每個(gè)校準(zhǔn)品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應(yīng)該懸臂加樣，避免交叉污染。

3、 合適的溫育時(shí)間，和充分的洗滌步驟，是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要條件。

4、 使用自動(dòng)洗板機(jī)時(shí)，加入一個(gè)30秒浸泡的步驟，可以提高檢測(cè)精度。

5、 底物溶液為無(wú)色液體，保存過(guò)程中變?yōu)樗{(lán)色，代表底物溶液已經(jīng)失效，不得使用。

6、 終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致，加入終止液后，藍(lán)色底物產(chǎn)物，會(huì)瞬間變?yōu)辄S色。

7、 實(shí)驗(yàn)中，用剩的板條，應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

8、 所有液體組分，使用前充分搖勻，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)標(biāo)明的時(shí)間、加樣量及加樣順序進(jìn)行溫育操作。

試劑盒組分與保存

未開(kāi)封的試劑盒保存在2-8度，不得使用過(guò)期試劑盒。

 

組分	數(shù)量	主要成分	開(kāi)封后儲(chǔ)存
校準(zhǔn)品	0.3ml/管	--	2-8℃14天
包被微孔板	96T/48T	預(yù)包被固相抗體	2-8℃14天
HRP標(biāo)記抗體	10mL	HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體	2-8℃14天
樣本稀釋液	6mL	--	2-8℃180天
底物液A	6mL	0.01%過(guò)氧化氫	2-8℃180天
底物液B	6mL	0.1%TMB	2-8℃180天
終止液	6mL	2mol/L稀硫酸	2-8℃180天
20×濃縮洗滌液	25mL	0.05%Tween20	2-8℃180天
說(shuō)明書(shū)	1份	--	--
自封袋	1個(gè)	--	--
不干膠	2片	--	--

校準(zhǔn)品濃度依次為：200、 100、 50、 25、 12.5、 6.25 ng/mL。

 

其他用品

1、 酶標(biāo)儀（450nm）

2、 精密移液器及一次性吸頭

3、 蒸餾水

4、 洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)

5、 37℃水浴鍋或恒溫箱

6、 500ml量筒

 

生物安全

1、 檢測(cè)必須符合實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染，所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)按照傳染物進(jìn)行處置。

2、 試劑盒的液體組分中，含有proclin-300防腐劑，可能引起皮膚過(guò)敏反應(yīng)，避免吸入煙霧與皮膚接觸。

3、 底物液對(duì)皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入煙霧。

4、 戴上防護(hù)手套，實(shí)驗(yàn)完成后徹底洗手。

樣品的采集和儲(chǔ)存

以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過(guò)程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1、 細(xì)胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細(xì)胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。

2、 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。

3、 血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。

樣本收集后，無(wú)法一次檢測(cè)完畢，請(qǐng)按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時(shí)在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。

4、 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1: 9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9 mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎或反復(fù)凍融。最后將勻漿液5000×g離心 5-10分鐘，取上清檢測(cè)。

5、 細(xì)胞提取液：貼壁細(xì)胞用冷的PBS輕輕清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g離心5分鐘后收集細(xì)胞；懸浮細(xì) 胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用冷的PBS洗滌3次。每 1×106 個(gè)細(xì)胞中加入150-200μLPBS重懸并通過(guò)反復(fù)凍融使細(xì)胞破碎(若含量很低可減少PBS的體積)。將提取液于1500×g離心10分鐘，取上清檢測(cè)。  

6、 其他生物體液：1000×g 離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測(cè)。

 

試劑準(zhǔn)備

1、 使用前，所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫60min，確保充分復(fù)溫到室溫。

2、 濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水，按1:20稀釋?zhuān)?份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水。

3、 底物：底物液A和B，在使用前，按1:1體積充分混合，混合后15分鐘內(nèi)使用。

4、 

結(jié)果計(jì)算

1、 以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo)（6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，加1個(gè)0值孔，共7個(gè)濃度點(diǎn)），對(duì)應(yīng)的吸光度（OD值）作為橫坐標(biāo)，利用計(jì)算機(jī)軟件，采用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl），創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，通過(guò)樣本的吸光度（OD值），利用方程計(jì)算樣品的濃度值。

2、 如果樣品被稀釋?zhuān)ㄟ^(guò)上述方法測(cè)的濃度值，要乘以稀釋倍數(shù)，才是樣品的最終濃度。

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無(wú)沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無(wú)破損漏氣。

2、劑量反應(yīng)曲線線性

校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值，大于等于0.9900。

3、精密度

批內(nèi)精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行二十次在同一個(gè)板塊內(nèi)精度評(píng)估。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%。

批間精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行二十次在不同板塊內(nèi)精度評(píng)估。批間變異系數(shù)CV%小于15%。

4、靈敏度

最低檢出劑量小于1.0 ng/mL。

5、回收率

三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行五次在同一個(gè)板塊內(nèi)回收率評(píng)估，回收率在85%-115%之間。

6、特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組人血紅蛋白A2（HbA2），與結(jié)構(gòu)類(lèi)似物無(wú)交叉。

7、穩(wěn)定性

2℃-8℃保存，有效期6個(gè)月。

5、 檢測(cè)范圍

6.25 ng/mL – 200 ng/mL。