睿信生物-人核心蛋白聚糖(DCN)elisa試劑盒
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泉州市睿信生物科技有限公司
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生產(chǎn)廠家
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福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學試劑盒、生化試劑、分子生物學試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務,涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構(gòu)、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質(zhì)量檢測試劑盒、方法學開發(fā)及實驗外包服務,為客戶的科學研究提供可靠的技術(shù)支持。公司干技術(shù)人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設備,并與知名高校、研究機構(gòu)、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設,我們采用了先進的內(nèi)部供應鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產(chǎn)品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
研究了hdHGF基因在畢赤酵母中的表達 .以人胎盤mRNA為模板 ,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄、重疊PCR獲得hdHGF全長和成熟基因片段 .將該基因片段克隆到pPIC9載體上 ,將重組表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)化巴斯德畢赤酵母 (Pichiapastoris)GS115,篩選mut+ 表型 ,經(jīng)甲醇誘導可實現(xiàn)rhdHGF的分泌表達 .經(jīng)搖瓶培養(yǎng)篩選出 4株表達水平較高的酵母工程菌株 ,SDS PAGE分析和Western印跡試驗表明 ,產(chǎn)物分子量約為80kD ,5L發(fā)酵罐高密度培養(yǎng)已使生物量達 13 5g L(干重 ) ,發(fā)酵液上清總蛋白量為 8 0g L ,電泳結(jié)果表明rhdHGF表達水平為總蛋白的 12 3 % .
人核心蛋白聚糖(DCN)elisa試劑盒
目的:探討胰腺癌、慢性胰腺炎患者和正常對照組胰腺組織和血清中BMP-2的表達水平及其相關意義。 方法:利用Western blot技術(shù)檢測10例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和6例正常胰腺組織中BMP-2蛋白水平。采用免疫組化技術(shù)檢測42例胰腺癌、13例慢性胰腺炎和10例正常胰腺組織中BMP-2的表達。用BMP-2 ELISA試劑盒檢測53例胰腺癌、7例慢性胰腺炎和20例健康志愿者血清BMP-2水平。比較胰腺癌患者胰腺組織中和血清中BMP-2的表達水平與慢性胰腺炎和正常對照組的差別,及其與胰腺癌患者病理因素的關系。 結(jié)果: 1.胰腺癌組胰腺組織BMP-2蛋白表達水平顯著高于慢性胰腺炎組和正常對照組(P0.05),而慢性胰腺炎組與正常對照組比較無顯著差異(P0.05)。 2.免疫組化顯示BMP-2表達于胰腺癌細胞胞漿內(nèi),而正常胰腺細胞和間質(zhì)細胞內(nèi)大多未見著色。胰腺癌組織BMP-2的陽性率顯著高于正常胰腺組織(P0.05)和慢性胰腺炎組織(P0.05);慢性胰腺炎組與正常胰腺組BMP-2陽性率無顯著差異(P0.05)。Ⅲ期患者胰腺癌組織BMP-2陽性率顯著高于Ⅰ+Ⅱ期患者(P0.05)。 3.胰腺癌患者血清BMP-2水平顯著高于健康志愿者和慢性胰腺炎患者(P0.05);慢性胰腺炎患者和健康志愿者血清BMP-2水平無顯著差異(P0.05)。
人核心蛋白聚糖(DCN)elisa試劑盒
基質(zhì)金屬蛋白酶-2 (MMP-2) 是由Huhtala P.等人在1990 年克隆表達的,其結(jié)構(gòu)中含有信號肽、前肽、催化區(qū)、纖維連接蛋白樣區(qū)域及血紅素結(jié)合樣區(qū)域。人類MMP-2基因編碼分子量約72kd 的酶原,經(jīng)活化后水解為65kd 的活性形式。MMP-2 是降解細胞外基質(zhì)骨架蛋白Ⅳ型膠原主要酶之一,其生理功能主要是參與,生殖以及生殖器官的復舊等。MMP-2 與的侵襲和轉(zhuǎn)移、自身性疾病自身免疫性疾病、牙周疾病以及組織的血管生成密切相關。鑒于MMP-2 的重要病理生理功能,本研究旨在基礎和兩方面對MMP-2 的功能作進一步探討。通過在體外表達MMP-2 所特有的結(jié)構(gòu)域,我們制備出抗MMP-2 的特異性單克隆抗體, 利用所制備的單克隆抗體初步建立了檢測血清/漿MMP-2 水平的試劑盒,并且對正常人及良惡性病人血清MMP-2 水平進行了測定和比較,這為檢測MMP-2 提供了一個有效的工具;運用RNA干擾(RNAi)技術(shù)對MMP-2 基因進行基因沉默,更進一步揭示了MMP-2 的功能及可能的作用機制;同時對基質(zhì)金屬蛋白酶在慢性粒細胞性白血病,這一特殊類型的中的作用進行了初步探討。