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微透析系統(tǒng)
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微透析技術具有連續(xù)取樣、動態(tài)觀察、定量分析、采樣量小、組織損傷輕等特點??稍诼榛蚯逍训纳矬w上使用, 特別適合于深部組織和重要器的活生化研究。 目前已成為實驗神經(jīng)生理學和神經(jīng)化學的重要研究工具之一, 它可提供遞質釋放、攝取和代謝的必要信息。
微透析(Microdialysis)技術是一種將灌流取樣和透析技術結合起來并逐漸完善的一種從生物體內進行動態(tài)微量生化取樣的新技術。
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目前測定回收率的方法主要有以下幾種:1,外標法計算被測物質相對濃度的變化時, 可簡單地采用體外回收率法。測定宜在取樣后立即進行, 將探針放入已知濃度的標準溶液中, 用與體內實驗相同的流速灌流探針。達到穩(wěn)定狀態(tài)后收集灌流液并進行檢測。測定濃度與標準溶液濃度之比就是體外回收率。此法雖簡單易行, 但由于被測物質在體外時與體內的環(huán)境狀況不同, 檢測結果不能嚴格地等同于實際的回收率。2,內標法往灌流液中加入已知濃度且性質與被分析物質相似的另一種物質做內標,內標物不僅在擴散性質上與被分析物一致,而且還要在體內的代謝過程中也盡可能一致,測出透析率即作為被分析物的回收率。由于選擇內標的局限性很大, 限制了此法的應用。3,反透析法假設被測物從兩個方向通過半透膜是同等的。在灌流液中加入一定濃度的內標物(Cic) ,在與體內透析相同的條件下操作, 測定透析液中內標物的濃度(Cec) ,體內回收率(Rin ,vivo ) 可用下式計算:Rin vivo = (1 Cec/ Cic) ×100 %本法要求內標物具有生物惰性, 盡可能與被測物相似。
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透析液收集器是將從探針中采集的樣本收集起來。所用容器為PCR96孔板或500ul離心管(將離心管放在收集器的孔板上用來盛放收集的樣品)。為了保證樣本不會變質,在收集器中特設置了一個低溫調節(jié)裝置。低溫調節(jié)裝置和收集器是分體的,通過電纜線進行連接,由收集器的控制面板進行溫度控制。溫度控制范圍0-4℃。這樣就保證了樣品的新鮮而且不會變質。采集速率5秒至99分鐘,1秒步進??赏瑫r采集1,2,4通道的透析液。
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