鵝疏螺旋體(鵝包柔螺旋體)探針法熒光定量PCR試劑盒
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上海博湖生物科技有限公司
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所在地區(qū)
上海市閔行區(qū)
以下是PCR鑒定試劑盒訂購信息:
產(chǎn)品名稱:鵝疏螺旋體(鵝包柔螺旋體)探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Borrelia afzelii
產(chǎn)品規(guī)格:50次
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:現(xiàn)貨
鵝疏螺旋體(鵝包柔螺旋體)探針法熒光定量PCR試劑盒特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:
2. 重現(xiàn)性:
3. 靈敏性:
4. 實(shí)用性:
具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 RNA 模板。
2. 兩管式 RT-PCR,一次 RT 反應(yīng)產(chǎn)物可以作為多次 PCR 的模板。本試劑盒提供 10 次的 RT 反應(yīng)試劑和 50 次的 PCR 試劑。
3. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性高,引物是根據(jù)基因的保守區(qū)域設(shè)計(jì),適用于所有強(qiáng)、中、弱新城疫毒株,產(chǎn)物長度為 421 bp。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
雷公藤內(nèi)酯甲 84104-71-2 檢測用對照品 無
云南松Pinus yunnanensis Massonianoside B none 188300-19-8 C25H32O10 蘆薈素01624
Emodin-8-glucoside大黃素-8-β-D-葡萄糖苷23313-21-520mg/支
酸氫二銨標(biāo)準(zhǔn)品7783-28-01g
蘿芙木Rauvolfia veicillata etxyl 3,4,5-imetxoxybenzoate 3,4,5-氧基本乙酯 6178-44-5 C12H16O5 ≥9
云南蘿芙木Rauvolfia yunnanensis Serpentine 蛇紋石素 18786-24-8 C21H21N2O3 ≥99%
鳶尾皇速TqctorigqninHPLC≥98%,20mg/支
地黃苷D;地黃苷D Rehmannioside D 81720-08-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
含量測定扶馬西尼100727-200601常溫,避光100mg
Allopurinol別嘌醇標(biāo)準(zhǔn)品315-30-0250mg
銀杏內(nèi)酯K Ginkgolide K 20mg/支
沒藥隊(duì)照藥材Myrrhconolmedicine1g
Balanophonin BALANOPHONIN 118916-57-7
紫外線吸收劑UV-329標(biāo)準(zhǔn)品3147-75-925mg紫外線吸收劑UV-329標(biāo)準(zhǔn)品
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操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。