技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

甲醇中異狄氏劑溶液 1.2ml Acinetobacter lwoffi魯氏不動桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中二溴甲烷溶液 1.2ml Acinetobacter spp.不動桿菌屬通用PCR試劑盒

甲醇中1,1-二氯乙烯溶液 1.2ml Acinetobacter spp.不動桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中反-1,2-二氯乙烯溶液 1.2ml Acinetobacter spp.不動桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中1,2-二氯丙烷溶液 1.2ml Acremonium strictum枝頂孢霉PCR試劑盒

甲醇中1,3-二氯丙烷溶液 1.2ml Acremonium strictum枝頂孢霉染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中一溴一氯甲烷溶液 1.2ml Acremonium strictum枝頂孢霉探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中對異丙基甲苯溶液 1.2ml Actinobacillus actinomycetemcomitans伴放線放線桿菌PCR試劑盒

甲醇中二氯甲烷溶液 1.2ml Actinobacillus actinomycetemcomitans伴放線放線桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中正丁基苯溶液 1.2ml Actinobacillus actinomycetemcomitans伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中仲丁基苯溶液 1.2ml Actinobacillus pleuropneumoniae豬胸膜放線桿菌PCR試劑盒

甲醇中叔丁基苯溶液 1.2ml Actinobacillus pleuropneumoniae豬胸膜放線桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中鄰氯甲苯溶液 1.2ml Actinobacillus pleuropneumoniae豬胸膜放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中對氯甲苯溶液 1.2ml Actinomadura madurae馬杜拉放線菌PCR試劑盒

甲醇中1,2-二溴-3-氯丙烷溶液 1.2ml Actinomadura madurae馬杜拉放線菌染料法熒光定量PCR試劑盒
枳實探針法PCR鑒定試劑盒圖片牛血清白蛋白(全組分)/牛白蛋白/乙?；椎鞍?小牛血清)/乙?；∨Ｑ灏椎鞍?牛血蛋白質(zhì)/BSABR，98%10克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，9048-46-82～8℃

25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

中文名稱： 牛血清白蛋白（全組分）

其他名稱： 牛白蛋白；乙?；椎鞍?/span>(小牛血清)；乙?；∨Ｑ灏椎鞍?；牛血蛋白質(zhì)

英文名稱： BSA

其他名稱： Albumin(bovine serum)；Bovine serum albumin；Bovine albumin

產(chǎn)品規(guī)格： BR，98%

包裝： 10克/25克/100克/1公斤

CAS號：9048-46-8

級別：BR

分子量：68kD

總蛋白含量：≥95.0%

總蛋白中BSA純度：≥98.0%

PH：6.5～7.1（5%水溶液）

1%水溶液OD403：≤0.15%（光密度法）

溶解性試驗：10%濃度，水溶解時間不超過15分鐘

硫酸銨含量：≤0.1%

性狀：粉末。溶于水，難于鹽析。吸光系數(shù)(E1%279nm)6.67。等電點4.8，由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合

用途：生化研究， 遺傳工程和藥物研究。蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)制備。肽酶及其他蛋白質(zhì)的穩(wěn)定劑

保存：2～8℃

1公斤，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，