睿信生物-大鼠阿立新A-Orexin-A
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泉州市睿信生物科技有限公司
店齡6年 企業(yè)認證
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生產(chǎn)廠家
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福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學試劑盒、生化試劑、分子生物學試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務,涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構(gòu)、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質(zhì)量檢測試劑盒、方法學開發(fā)及實驗外包服務,為客戶的科學研究提供可靠的技術(shù)支持。公司干技術(shù)人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設備,并與知名高校、研究機構(gòu)、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設,我們采用了先進的內(nèi)部供應鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產(chǎn)品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
大鼠阿立新A Orexin A ELISA試劑盒
目的探討血清總膽汁酸、α-谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)、嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)和鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)對肝損傷早期的應用價值。方法 Wistar大鼠分別ig給予CCl40.02,0.05和0.08 m.l kg-1,每天1次,連續(xù)10 d。于給CCl4后第1天和第3天采集血清,采用全自動生化儀測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、堿性磷酸酶、總膽紅素以及總膽汁酸的水平,采用ELISA測定血清α-GST,PNP和OCT的水平;于給CCl4后第10天,測定血清GPT、GOT、堿性磷酸酶及總膽紅素,計算大鼠的肝指數(shù),觀察肝組織病理學變化。通過Logistic回歸建立回歸模型,分別用ROC曲線分析給CCl4后第1和第3天總膽汁酸、α-GST、PNP和OCT以及GPT和GOT對CCl4致大鼠肝損傷早期的意義。結(jié)果與正常對照組同時間點相比,給CCl4第1天,CCl40.02,0.05和0.08 ml.kg-1組PNP均升高(P<0.05,P<0.01),CCl40.08 m.l kg-1組GPT和總膽汁酸升高(P<0.05,P<0.01);給CCl4第3天,CCl40.05和0.08 m.l kg-1組GOT,α-GST和OCT升高(P<0.05,P<0.01);給CCl4第10天,CCl40.02,0.05和0.08 m.l kg-1組大鼠肝指數(shù)均顯著升高(P<0.01),肝出現(xiàn)嚴重的肝細胞脂肪變性(P<0.01)。大鼠血清中GPT、GOT、總膽汁酸、α-GST、PNP和OCT的ROC曲線下面積分別為0.786,0.728,0.878,0.629,0.850和0.571。
目的 膿毒癥(sepsis)易造成多器官功能障礙,其中心臟是容易受累的器官之一,且早期就可出現(xiàn)收縮和舒張功能下降。但膿毒癥時心功能障礙的具體機制尚未明確,以往研究證實細胞因子在膿毒癥心功能障礙的發(fā)生與發(fā)展中起重要作用,而在眾多的炎癥介質(zhì)中,目前TNF-α被公認為炎癥反應的主要細胞因子。以往研究也證實β3腎上腺素能受體(β3-AR)變化在心力衰竭的發(fā)生發(fā)展中起重要作用,但其與膿毒癥心功能障礙的關系鮮有報道。本實驗通過行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(cecalligation and puncture,CLP)復制出大鼠膿毒癥模型,動態(tài)觀察在此期間心肌TNF-α和β3-AR的變化,探討TNF-α和β3-AR在膿毒癥心臟的表達變化和意義,為膿毒癥心功能障礙提供理論依據(jù)。 方法 1、模型建立和取材 選用我院提供的雄性wistar大鼠200—220g為研究對象制備大鼠盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)膿毒癥模型。膿毒癥組(CLP)分別于術(shù)后6、18、24、36小時取材,分離左心室,切取一部分固定后石蠟包埋,制備臘塊及病理切片,剩余-80℃冷藏備用;封閉組(anti-TNFα-mAb):術(shù)前30分鐘給予anti-TNFα-mAb 0.1mg/kg溶于0.9%氯化鈉溶液0.1ml中腹腔,其余組等量0.9%氯化鈉溶液。