睿信生物-小鼠可溶性瘦素受體-sLR-ELISA
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泉州市睿信生物科技有限公司
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生產(chǎn)廠家
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福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學(xué)發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、分子生物學(xué)試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù),涵蓋分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構(gòu)、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質(zhì)量檢測試劑盒、方法學(xué)開發(fā)及實驗外包服務(wù),為客戶的科學(xué)研究提供可靠的技術(shù)支持。公司干技術(shù)人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設(shè)備,并與知名高校、研究機構(gòu)、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關(guān)系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設(shè),我們采用了先進的內(nèi)部供應(yīng)鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產(chǎn)品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
小鼠可溶性瘦素受體 sLR ELISA 試劑盒
為了建立捕獲法ELISA檢測基孔肯雅IgM抗體的方法,本研究分離基孔肯雅結(jié)構(gòu)蛋白編碼基因CE3-E2-6K-E1基因元件,通過昆蟲細胞桿狀表達體系,制備樣顆粒,免疫昆明鼠制備多克隆抗體,純化后用辣根過氧化物酶標記,建立一種以羊抗人IgM抗體、VLPs抗原和酶標多克隆抗體為基礎(chǔ)的MacELISA檢測基孔肯雅IgM抗體的方法,通過商業(yè)化質(zhì)控血清,實驗室確診基孔肯雅熱、腎綜合癥出血熱患者和健康人群血清標本對所建立方法進行優(yōu)化和初步評價,并與德國歐蒙公司商業(yè)化CHIKV IgM抗體檢測試劑盒IIFA-IgM進行比較研究。所建立方法特異性為99%(99/100),重復(fù)性檢測板內(nèi)變異性系數(shù)低于10%,板間變異系數(shù)低于15%,檢測限明顯低于IIFA-IgM商業(yè)化試劑盒(P<0.0001)。
為評價小鼠肝炎(MHV)抗體ELISA和IFA檢測試劑盒的真實性,選擇兩種進口MHV抗體ELISA和IFA試劑盒檢測26份小鼠血清,并對檢測結(jié)果進行對比評價。檢測結(jié)果顯示,26份血清中,13份兩種試劑盒檢測的結(jié)果全為陽性,11份全為陰性,剩余2份分別為ELISA陽性、IFA陰性。評價結(jié)果顯示,參比IFA,ELISA試劑盒靈敏度為100%,特異度為84.61%,誤診率為15.38%,漏診率為0,準確度為92.30%,正確指數(shù)為0.846,陽性似然比為650%,陰性似然比為0。結(jié)果初步證實,ELISA試劑盒配合IFA試劑盒適用于MHV抗體的日常監(jiān)測。