技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

甲醇中雙苯氟脲溶液標準樣品（氟酰脲） 1ml Astrovirus(AV)星狀病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

甲醇中微囊藻毒素RR溶液標準樣品 1ml Astrovirus(AV)星狀病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

水中靛藍溶液標準樣品 5ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒

甲醇中烯草酮溶液標準樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

正己烷中苯酰菌胺溶液標準樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中精甲霜靈溶液標準樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒PCR試劑盒

甲醇中嘧菌環(huán)胺溶液標準樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中增效醚溶液標準樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中氯吡脲溶液標準樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒RT-PCR試劑盒

甲醇中啶酰菌胺溶液標準樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

正己烷中戊菌唑溶液標準樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

丙酮中噻蟲啉溶液標準樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽病毒RT-PCR試劑盒

甲醇中喹螨醚溶液標準樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

甲醇中苯氧威溶液標準樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

正己烷中唑螨酯溶液標準樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽病毒1型PCR試劑盒
絲瓜絡(luò)LAMP鑒定試劑盒免費代測維生素B3/煙酸/菸酸/3-吡啶羧酸/吡啶-3-羧酸/3-噼啉酸/吡啶-3-甲酸/3-吡啶羥酸/吡啶-3-羥酸/3-噼啉酸/尼克酸/尼古丁酸/氮苯酸-[3]/煙堿素/3-吡啶甲酸/VB3CP，99%25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，59-67-6RT，避光

100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

500克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

中文名稱： 維生素B3

其他名稱： 煙酸；菸酸；3-吡啶羧酸；吡啶-3-羧酸；3-噼啉酸；吡啶-3-甲酸；3-吡啶羥酸；吡啶-3-羥酸；3-噼啉酸；尼克酸；尼古丁酸；氮苯酸-[3]；煙堿素；3-吡啶甲酸

英文名稱： VB3

其他名稱： Nicotinic acid；Niacin；3-Pyridinecarboxylic acid；3-Carboxypyridine

產(chǎn)品規(guī)格： CP，99%

包裝：25克/100克/500克

CAS號：59-67-6

C6H5NO2=123.11

級別：CP

含量：≥99.0%

熔點：234～238℃

硫酸鹽：≤0.01%

氯化物：≤0.005%

重金屬：≤0.001%

灼燒殘渣：≤0.05%

性狀：粉末或針狀結(jié)晶。無氣味，味微酸，在空氣中不潮解而穩(wěn)定。能升華而不分解。1g溶于60ml水，易溶于沸水、沸乙醇、氫氧化堿和碳酸堿溶液，溶于丙二醇。飽和水溶液的pH 2.7。*吸收波長263nm

用途：生化研究。營養(yǎng)劑，配制組織培養(yǎng)基

保存：RT，避光