實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

甲醇中嘧菌環(huán)胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中增效醚溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中氯吡脲溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒RT-PCR試劑盒

甲醇中啶酰菌胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

正己烷中戊菌唑溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

丙酮中噻蟲啉溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽病毒RT-PCR試劑盒

甲醇中喹螨醚溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

甲醇中苯氧威溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

正己烷中唑螨酯溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽病毒1型PCR試劑盒

正己烷中虱螨脲溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽病毒1型染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中噻蟲胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中利谷隆溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 2(Gallid Herpesvirus-2、GaHV-2)禽病毒2型PCR試劑盒

甲醇中甲氧蟲酰肼溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 2(Gallid Herpesvirus-2、GaHV-2)禽病毒2型染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中呋線威溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 2(Gallid Herpesvirus-2、GaHV-2)禽病毒2型探針法熒光定量PCR試劑盒

異丙醇中矮壯素溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus(Gallid Herpesvirus、GaHV)禽病毒通用PCR試劑盒
天冬LAMP鑒定試劑盒廠家鹽酸吡哆醛/吡哆醛鹽酸鹽/鹽酸吡醛素/3-羥基-5-羥甲基-2-甲基-4-吡啶甲醛鹽酸鹽/3-羥基-5-羥甲基-2-甲基異煙酰醛鹽酸鹽/鹽酸維生素B6醛/2-甲基-3-羥基-4-甲酰-5-羥甲基吡啶鹽酸鹽/鹽酸3-羥基-5-(羥甲基)-2-甲基煙酰醛/Pyridoxal hydrochlorideBR，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，65-22-52～8℃，避光

5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

中文名稱： 鹽酸吡哆醛

其他名稱： 吡哆醛鹽酸鹽；鹽酸吡醛素；3-羥基-5-羥甲基-2-甲基-4-吡啶甲醛鹽酸鹽；3-羥基-5-羥甲基-2-甲基異煙酰醛鹽酸鹽；鹽酸維生素B6醛；2-甲基-3-羥基-4-甲酰-5-羥甲基吡啶鹽酸鹽；鹽酸3-羥基-5-(羥甲基)-2-甲基煙酰醛

英文名稱： Pyridoxal hydrochloride

其他名稱： 3-Hydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-methylisonicotinaldehyde hydrochlordie；2-Methyl-3-hydroxy-4-formyl-5-hydroxymethylpyridine hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格： BR，98%

包裝：1克/5克/25克/100克

CAS號：65-22-5

C8H9NO3·HC1=203.62

級別：BR

含量：≥98.0%

熔點：171～175℃

PH：2.0～4.0

氮含量：6.7～7.1%

灼燒殘渣：≤0.1%

性狀：淡黃色粉末。能被還原成吡哆醇，對光敏感。易溶于水(0.5g/ml)，微溶于乙醇(1.7g/100ml、95％乙醇)。1％水溶液pH為2.65。水溶液對熱敏感。*吸收波長 292.5nm(ε 7600)。

用途：生化研究。營養(yǎng)劑、制造維生素B6。用于標(biāo)記和在皮摩爾水平（10-12摩爾）檢測下述物質(zhì)：氨基酸、輔酶和輔助因子、磷酸吡哆醛以及維生素 B6

保存：2～8℃，避光