小鼠皮下結(jié)締組織細胞來源于ATCC原代細胞，ATCC傳代細胞，sciencell細胞

原代凍存或復(fù)蘇培養(yǎng)，復(fù)蘇時間1-2周，保證細胞純度在98%以上，同時也需經(jīng)過微生物檢測，保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌.   

細胞名稱 ：小鼠皮下結(jié)締組織細胞

簡稱: A9  

組織來源：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織和脂肪；正常

培養(yǎng)條件：DMEM +10% FBS

形       態(tài)：貼壁；成纖維細胞樣

背       景：A9細胞株由野生型細胞株L中分離得到。對HAT選擇培養(yǎng)基敏感，并缺失了腺苷轉(zhuǎn)磷酸核糖基酶與次黃嘌呤轉(zhuǎn)磷酸核糖基酶 對8-氮鳥嘌呤(0.003mg/mL)和6-硫代鳥嘌呤(0.1mM)有抗性。

細胞數(shù): 1×106cells

規(guī)格: 1ml/T25

運輸保存:采用干冰保存運輸

細胞用途：僅供科研使用

小鼠皮下結(jié)締組織細胞培養(yǎng)操作規(guī)程僅供參考

準備好培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件及凍存液。

細胞處理

復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)

細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，*的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。

小鼠皮下結(jié)締組織細胞購買細胞注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件.

6. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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