睿信生物-大鼠可溶性P選擇素-sP-selectin-ELISA試劑盒
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泉州市睿信生物科技有限公司
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福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質科研elisa試劑盒、化學發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術公司,目前可提供各種抗體、免疫學試劑盒、生化試劑、分子生物學試劑等高品質產品及服務,涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質量檢測試劑盒、方法學開發(fā)及實驗外包服務,為客戶的科學研究提供可靠的技術支持。公司干技術人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產設備,并與知名高校、研究機構、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設,我們采用了先進的內部供應鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質的產品及服務是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
大鼠可溶性P選擇素 sP-selectin ELISA試劑盒
目的 研究雌在誘發(fā)實驗性自身免疫性甲狀腺炎 (EAT)形成中的影響。方法 10周齡Wistar大鼠進行雙側卵巢切除術后采用同種屬SD大鼠甲狀腺球蛋白 (Tg)免疫誘發(fā)EAT。病理切片HE染色觀察甲狀腺炎癥反應。采用放免方法測定血清中E2 、PRL水平。間接酶聯(lián)免疫吸附實驗 (ELISA )測定血清Tg抗體 (TgAb)水平。逆轉錄 聚合酶鏈反應 (RT PCR)檢測甲狀腺組織中γ 干擾素 (IFN γ)、白細胞介素 10 (IL 10 )mRNA的表達水平。結果 大鼠切除雙側卵巢后 ,其血清中雌二醇 ( 17.60± 1.0 2 )pmol/L和PRL( 2 .45± 0 .15 ) μg/L水平明顯低于未切除卵巢組〔分別為 ( 5 8.5 6± 6.99) pmol/L和 ( 3 .2 2± 0 .17) μg/L〕(均P 0 .0 1) ,實驗性自身免疫性甲狀腺炎的發(fā)病率和甲狀腺組織中炎細胞浸潤程度也均較未切除卵巢直接誘發(fā)EAT組明顯減輕 ,甲狀腺組織中IFN γmRNA的表達水平 ( 0 .87± 0 .0 3 )較未切除卵巢直接誘發(fā)EAT組 ( 0 .99± 0 .0 0 )明顯下降 (P 0 .0 5 ) ,而IL 10mRNA的表達水平 ( 0 .98± 0 .0 1)則高于未切除卵巢直接誘發(fā)EAT組 ( 0 .83± 0 .0 5 )。誘發(fā)為EAT的兩組大鼠血清TGAb平均水平 ( 1.3 9± 0 .0 3 )明顯高于非誘發(fā)EAT對照組的平均水平 ( 0 .18± 0 .0 0 )(P 0 .0 1)。結論 雌水平低下可
目的 觀察去乙?;奈改c(unacylated ghrelin,UAG)聯(lián)合粒細胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G - CSF)和堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)促進2 型糖尿病大鼠后肢缺血模型血管新生的作用,并探討其作用機制.方法 建立大鼠糖尿病后肢缺血模型及正常大鼠后肢缺血模型各60 只,且各隨機分成對照組、bFGF + G - CSF 組、UAG + bFGF + G - CSF 組各20 只.UAG 30umol/kg 隔日一次腹腔,共14 天;連續(xù)七天皮下G - CSF 10ug/kg ;第1 、3 、5 、7 、天缺血區(qū)肌注bFGF5ug/kg.術后一周,應用ELISA 試劑盒測定缺血肌肉組織基質金屬蛋白酶- 9(matrix metalloproteinases - 9,MMP - 9)表達.四周后取后肢缺血部位肌肉組織行免疫組化觀察CD34 陽性表達血管數(shù).結果 MMP9 表達及計數(shù)(1)非糖尿病大鼠,N2 vs N1 、N3 vs N1 有極顯著差異( P < 0.01 ),N2 、N3 比較無顯著差異( P > 0.05) ;(2)糖尿病大鼠各組間比較均有極顯著差異( P < 0.01) ;(3 )糖尿病大鼠與非糖尿病大鼠分別比較,N1 vsD1 、N2 vs D2 均有顯著差異( P < 0.05),UAG 輸注組無統(tǒng)計學意義( P > 0.05).結論 bFGF 聯(lián)合G - CSF 能促進大鼠缺血后肢血管新生,糖尿病大鼠缺血后肢血管新生能力明顯弱于正常大鼠,UAG 聯(lián)合bFGF 和G - CSF 能明顯促進糖尿病大鼠缺血后肢血管新生.