睿信生物-小鼠腦啡肽-ENK-ELISA試劑盒
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泉州市睿信生物科技有限公司
店齡6年 企業(yè)認證
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生產(chǎn)廠家
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福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務及品牌代理為一體的生物技術公司,目前可提供各種抗體、免疫學試劑盒、生化試劑、分子生物學試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務,涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質(zhì)量檢測試劑盒、方法學開發(fā)及實驗外包服務,為客戶的科學研究提供可靠的技術支持。公司干技術人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設備,并與知名高校、研究機構、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設,我們采用了先進的內(nèi)部供應鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產(chǎn)品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
小鼠腦啡肽 ENK ELISA試劑盒
腦啡肽(ENK)是阿片肽家族的重要成員之一,在神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)發(fā)揮多種生理功能。ENK能神經(jīng)元是脊髓背角內(nèi)重要的抑制性中間神經(jīng)元,在感覺信息傳遞和調(diào)控中具有重要作用。由于成熟中間神經(jīng)元的結構和功能形成于發(fā)育時期,很有必要從發(fā)育階段對其開展研究。但目前脊髓內(nèi)ENK能神經(jīng)元的發(fā)育模式尚不清楚。我們利用改良的人工染色體(BAC)技術制備了能夠特異顯示神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)ENK能神經(jīng)元的PPE-GFP(前腦啡肽原-綠色熒光蛋白)轉(zhuǎn)基因小鼠,在該小鼠中GFP的表達受PPE啟動子的調(diào)控,因此所有ENK能神經(jīng)元均呈現(xiàn)GFP陽性。我們采用免疫熒光組織化學等技術,對小鼠頸段脊髓腦啡肽能神經(jīng)元的發(fā)育特點和規(guī)律進行了觀察。結果顯示,GFP陽性的ENK能神經(jīng)元最早出現(xiàn)在胚胎11.5天(E11.5)脊髓腹內(nèi)側(cè)部;E13時,ENK能神經(jīng)元數(shù)量增多,主要位于中間帶;至E14,在脊髓背側(cè)部及中間帶背側(cè)部開始出現(xiàn)ENK能神經(jīng)元,隨著胎齡的增長,背側(cè)部ENK能神經(jīng)元逐漸增多而腹側(cè)部數(shù)量逐漸減少,ENK能神經(jīng)元總量于E18達到高峰。至生后第14天,大量ENK能神經(jīng)元密集分布在脊髓背角淺層及深層內(nèi)側(cè)部,在前角僅散在分布,與成年的分布模式相似。本研究表明小鼠脊髓ENK能神經(jīng)元的分布具有明顯的時空變化特點,呈腹側(cè)-背側(cè)過渡的發(fā)育模式。