光譜分析儀的使用方法教程

一、方法：在分析中必須對分光光度計設(shè)定一些必要的參數(shù)，這些參數(shù)的組合就形成一個“方法”。Lambda系列 WinLab軟件預設(shè)四類常用方法。

1）掃描（SCAN），用以進行光譜掃描。

2）時間驅(qū)動（TIME DRIVER），用以觀察一定時間內(nèi)某種特定波長處縱坐標值的變化，如酶動力學。

3）波長編程（WP）用以在多個波長下測定樣品在一定時間內(nèi)的縱坐標值變化，并可以計算這些縱坐標值的差或比值。

4）濃度（CONC）用以建立標準曲線并測定濃度。

2.1 進入所需方法，在方法窗口中選擇所需方法的文件名。

二、方法的設(shè)定

掃描、波長編程及時間驅(qū)動各項方法可根據(jù)顯示的參數(shù)表，逐項按需要選用或填入，并可參考提示。

濃度

濃度方法窗口下方標簽較多，說明做濃度測定時需要參數(shù)較多。用鼠標指按每一標簽，可翻出下頁，其上有一些需要測定的參數(shù)。必須逐頁設(shè)定。

三、工具條

1）SETUP

當所需的各項參數(shù)都已在參數(shù)中設(shè)好后，必須用鼠標指按SETUP，才能將儀器調(diào)整到所設(shè)狀態(tài)。

2）AUTOZERO 用鼠標指按此鍵，分光光度計即進行調(diào)零（在光譜掃描中則進行基線校正）。

3）START 用鼠標指按此鍵，光度計即開始運行所設(shè)定的方法。

四、方法運行

1）掃描，時間驅(qū)動，波長編程方法選好后，先放入?yún)⒈热芤?，按AUTOZERO鍵，進行自自動校零或背景校正結(jié)束后再放入樣品，按START，分光光度計即開始進行，同時屏幕上出現(xiàn)圖形窗口，將結(jié)果顯示出來。

2）濃度

3）制訂標準曲線

（1）方法選好后，確認各項數(shù)據(jù)正確，特別是REFS頁中第1行要選中右上角的“edit mode”。再放入?yún)⒈热芤?，按AUTOZERO鍵自動校零或背景校正。

（2）按setup，待該圖標消失后，再按“start”，按提示依次放入標準色列的各管溶液，每次都按提示進行操作。

（3）標準色列測定完畢后，屏幕上出現(xiàn)calibgraphwindow，顯示擬合的標準線，并標出各項標準管的位置，屏幕下方還有一條ConcentraTIon mode的對話框，可以用來修改擬合的曲線類型（按 change calbraTIon），或修改標準溶液的任何一管（replace），或取消某一管（delete），或增加標準溶液管數(shù)（add）。如過已經(jīng)滿意，則按analyse sample鍵，進入樣品測定窗口。

（4）標準曲線有關(guān)的各項數(shù)據(jù)，均在calibresultwindow中，可用鼠標將其調(diào)出觀察。其中包括每個標準溶液的具體數(shù)據(jù)，標準曲線的回程方程式，相關(guān)系數(shù)，殘差。

五、樣品濃度測定

剛制定好的標準曲線接著進行樣品濃度測定時

1）只需在concentraTIon mode對話框按analyse sample鍵，進入樣品測定窗口。

2 ）按設(shè)定的樣品順序放入各樣品管，每次按提示進行操作。

3 ）屏幕上出現(xiàn)結(jié)果窗口，結(jié)果數(shù)據(jù)將依次顯示在樣品表中的相應(yīng)位置。

（1）利用原有的標準曲線接著進行樣品濃度測定時

（2）調(diào)出所測定樣品的濃度方法文件，首先調(diào)出refs頁，將原設(shè)edit mode選項取消，改設(shè)左上角的using exiting calibration。重新將方法存盤，則今后再調(diào)用時即不需再作修改。

（3） 在sample頁中按要求重設(shè)各種樣品名稱機樣品信息。

（4）按工具條中setup鍵，將主機設(shè)到該方法所設(shè)定的條件。

（5）將參比溶液放入比色室，按autozero鍵做背景校零。

（6） 按start鍵，按設(shè)定的樣品順序放入各樣品管，每次按提示進行操作。

（7） 屏幕上出現(xiàn)結(jié)果窗口，結(jié)果數(shù)據(jù)將依次顯示在樣品表中相應(yīng)位置。

六、關(guān)機

1）將方法及數(shù)據(jù)存盤

2）關(guān)閉方法窗

3）退出WinLab

4） 取出樣品及參比溶液

5）清潔光譜儀，特別是樣品室

6）關(guān)閉光譜電源

7）關(guān)閉計算機電源