睿信生物-羊CAAT區(qū)-增強子結(jié)合蛋白--C-EBP--ELISA試劑盒
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泉州市睿信生物科技有限公司
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福建省泉州市
公司介紹
生物分析方法開發(fā)
分析方法驗證
高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學發(fā)光試劑盒開發(fā)與定制
供科研使用,不得用于檢驗。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學試劑盒、生化試劑、分子生物學試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù),涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學領(lǐng)域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國市場。
我們致力于為高等院校、研究機構(gòu)、試劑廠家、生物制藥公司、動物造模公司等科研單位,提供高質(zhì)量檢測試劑盒、方法學開發(fā)及實驗外包服務(wù),為客戶的科學研究提供可靠的技術(shù)支持。公司干技術(shù)人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗,是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設(shè)備,并與知名高校、研究機構(gòu)、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關(guān)系。公司自成立以來,就非常注重企業(yè)信息化的建設(shè),我們采用了先進的內(nèi)部供應(yīng)鏈信息處理平臺,客戶的需求可以準確、處理。
為每一位科研人員獻上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
注意事項:
1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3. 板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,不能使用過期產(chǎn)品。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
羊CAAT區(qū);增強子結(jié)合蛋白α C;EBPα ELISA試劑盒
目的:觀察1,25-二羥基維生素D3[1,25(OH)2D3]對屋塵螨抗原(Dermatophagoides pteronyssinus, Der p)直接作用的P815肥大細胞Toll樣受體4(toll-like receptor 4,TLR4)表達及白細胞介素-4(interleukin-4, IL-4)分泌的影響,探討1,25(OH)2D3在肥大細胞中的作用。方法用不同濃度Der p、1,25(OH)2D3單獨或聯(lián)合激發(fā)P815細胞,收集激發(fā)細胞和上清。用real-time PCR及Westernblot法檢測P815細胞TLR4表達,ELISA法檢測上清中IL-4濃度。結(jié)果(1)P815細胞表達TLR4;不同濃度Der p均可上調(diào)P815細胞TLR4表達,且36 h組TLR4表達有明顯濃度依賴性上調(diào);(2) Der p可促進IL-4釋放(P<0.05);(3)不同濃度1,25(OH)2D3單獨激發(fā)對P815細胞TLR4表達及IL-4分泌均無明顯影響(P>0.05);(4)10-8 mol/L 1,25(OH)2D3可增強Der p對P815細胞TLR4表達的促進作用(P<0.01),1,25(OH)2D3可Der p引起的IL-4的分泌(P<0.05或P<0.01),且1,25(OH)2D3濃度越高,作用越強。結(jié)論(1)塵螨抗原可通過上調(diào)肥大細胞TLR4表達,增加IL-4分泌,促進炎癥及過敏反應(yīng)的發(fā)生。(2)1,25(OH)2D3對塵螨抗原引起的肥大細胞免疫應(yīng)答的干預作用可能是通過IL-4的合成和分泌,從而Th2型免疫應(yīng)答。
目的 采用SH-SY5Y細胞研究環(huán)境因素鋁和遺傳因素ApoE S4基因分別及聯(lián)合作用的情況下,對tau蛋白不同位點磷酸化水平和Aβ表達的影響,探討鋁和ApoEε4是否存在交互作用。 方法 培養(yǎng)并選取SH-SY5Y細胞,分別進行AICl3染毒和ApoE ε4轉(zhuǎn)染處理,實驗分組包括空白對照組、200μM AlCl3的低劑量組、400μM AlCl3的中劑量組、800μM AlCl3的高劑量組、空質(zhì)粒組、ApoE ε4組、400μM AlCl3+ApoEε4組。AICl3染毒或ApoE ε4轉(zhuǎn)染48h后,采用CCK-8試劑盒測定細胞活力;采用ELISA試劑盒測定總tau蛋白、tau-181、tau-231、au-262、tau-396和Aβ-40含量;采用析因設(shè)計的方法分析AICl3和ApoE s4是否存在交互作用。 結(jié)果 1.隨著AlCl3染毒劑量的增高,SH-SY5Y細胞數(shù)量逐漸減少,突觸變短消失;CCK-8檢測結(jié)果顯示細胞活力逐漸下降,200μM AlCl3的低劑量組、400μM AlCl3的中劑量組、800μM AICl3的高劑量組活力顯著低于空白對照組(P0.05); ELISA檢測結(jié)果顯示,200μM AlCl3的低劑量組、400μM AlCl3的中劑量組、800μM AlCl3的高劑量組相較于空白對照組,總tau蛋白、tau-181、tau-231、tau-262、tau-396和Aβ-40含量均有顯著升高(P0.05)。 2.經(jīng)ApoE ε4轉(zhuǎn)染后,SH-SY5Y細胞形態(tài)趨于圓形,易崩解死亡;