睿信生物-牛雌酮-E1-ELISA試劑盒
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高品質(zhì)科研elisa試劑盒、化學(xué)發(fā)光試劑盒開(kāi)發(fā)與定制
供科研使用,不得用于臨床檢驗(yàn)。
泉州市睿信生物科技有限公司是集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司,目前可提供各種抗體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、分子生物學(xué)試劑等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù),涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。依托湖北武漢、江蘇南京、福建泉州三大研發(fā)及銷售 ,布局全國(guó)市場(chǎng)。
我們致力于為高等院校、研究機(jī)構(gòu)、診斷試劑廠家、生物制藥公司、動(dòng)物造模公司等科研單位,提供高質(zhì)量檢測(cè)試劑盒、方法學(xué)開(kāi)發(fā)及實(shí)驗(yàn)外包服務(wù),為客戶的科學(xué)研究提供可靠的技術(shù)支持。公司干技術(shù)人員均有10年以上的從業(yè)經(jīng)驗(yàn),是值得您信賴的科研伙伴!
企業(yè)建立了完善的研發(fā)系統(tǒng)和生產(chǎn)設(shè)備,并與知名高校、研究機(jī)構(gòu)、 企業(yè)等建立戰(zhàn)略合作關(guān)系。公司自成立以來(lái),就非常注重企業(yè)信息化的建設(shè),我們采用了先進(jìn)的內(nèi)部供應(yīng)鏈信息處理平臺(tái),保證客戶的需求可以準(zhǔn)確、高效處理。
為每一位科研人員獻(xiàn)上高品質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)是我們的使命。
樣本處理:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?/font>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射,不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
牛雌酮 E1 ELISA試劑盒
摘 要: 目的:觀察不同類型乙型病毒性肝炎患者中炎性因子的表達(dá)及組蛋白去乙?;?(HDAC1)的表達(dá),探討其在不同程度肝損傷患者中發(fā)生的意義。方法:收集臨床乙型病毒性肝炎重型、重度、輕度患者及健康人外周血標(biāo)本,分離血清及單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),用ELISA方法檢測(cè)各組血清中IL-4、TNF-α、IFN-γ的表達(dá)及PBMC中HDAC1的表達(dá),用RT-PCR方法檢測(cè)PBMC中HDAC1 mRNA的表達(dá)。結(jié)果:IL-4、TNF-α、IFN-γ與HDAC1蛋白表達(dá)水平的相關(guān)性較高,重型組與重度組之間以及輕度組與正常人組之間的炎性因子表達(dá)及HDAC1表達(dá)差異無(wú)顯著性意義(P〉0.05),與輕度組和正常人組相比,重型組和重度組的IL-4、TNF-α、IFN-γ及HDAC1的蛋白表達(dá)以及HDAC1 mRNA的表達(dá)均升高。結(jié)論:IL-4、TNF-α、IFN-γ等相關(guān)炎癥因子與乙型病毒性肝炎的病情程度密切相關(guān),HDAC1在炎癥因子的表達(dá)過(guò)程中可能發(fā)揮重要作用。
牛雌酮 E1 ELISA試劑盒
目的研究鈣蛋白酶抑制劑 ALLN對(duì)缺血-再灌注(I-R)大鼠心肌肌漿網(wǎng)鈣泵(SERCA)功能的影響。方法 24只雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常灌注組(對(duì)照組)、I-R組、ALLN+I-R組和二甲亞砜+I-R組(DMSO+I-R組),分別檢測(cè)再灌注15min 時(shí)冠狀動(dòng)脈流出量(CF)和冠脈流出液中乳酸脫氫酶(LDH)漏出量;熒光分光光度計(jì)測(cè)定熒光強(qiáng)度來(lái)反映鈣蛋白酶活性;分別采用改良p-NPP法和 Millipore過(guò)濾技術(shù)測(cè)定SERCA的活性和ATP依賴的SERCA45Ca2+攝取率,免疫印跡法檢測(cè)心肌細(xì)胞SERCA蛋白表達(dá)水平。結(jié)果與 I-R組相比,ALLN+I-R組CF、SERCA蛋白表達(dá)水平、SERCA的活性和45Ca2+攝取率顯著增高(P0.01),而LDH漏出量和鈣蛋白 酶活性顯著降低(P0.01)。結(jié)論 ALLN對(duì)離體大鼠心臟I-R損傷有保護(hù)作用,與其抑制鈣蛋白酶活性,一定程度減輕I-R損傷對(duì)SERCA功能及蛋白表達(dá)水平的影響有關(guān)。
牛雌酮 E1 ELISA試劑盒
目的:熱休克蛋白90α(HSP 90α)是細(xì)胞受應(yīng)激原刺激后誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種應(yīng)激蛋白,在腫瘤組織中HSP90α表達(dá)量達(dá)正常組織表達(dá)水平的2-10倍。其在血液中的含量與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)。HSP90α作為一種全新腫瘤標(biāo)志物,用于肺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌等多個(gè)腫瘤的臨床檢測(cè)。患者血漿中HSP90α含量水平對(duì)應(yīng)患者病情變化,可實(shí)時(shí)、較準(zhǔn)確地反映治療效果,在臨床上可為醫(yī)生提供診斷、治療、預(yù)后的客觀依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)針對(duì)此蛋白進(jìn)行系統(tǒng)研究,建立人血清中熱休克蛋白90α(HSP90α)的熒光免疫層析定量檢測(cè)方法。方法:1、采用人HSP90α融合蛋白,進(jìn)行抗原純度、濃度和生物活性的鑒定,免疫小鼠、利用間接酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)效價(jià)鑒定、細(xì)胞融合、單克隆抗體制備、單抗純度和亞型鑒定、蛋白純化等實(shí)驗(yàn)操作步驟制備純度較高的HSP90α單克隆抗體和多克隆抗體。2、研制用于定量檢測(cè)的熒光免疫層析檢測(cè)試紙條,通過(guò)采用熒光免疫層析技術(shù),對(duì)熒光微球制備工藝進(jìn)行優(yōu)化,并對(duì)最佳反應(yīng)時(shí)間、線性范圍、精密性、回收率、臨床檢測(cè)等性能評(píng)價(jià)方面進(jìn)行系統(tǒng)研究。初步建立了熱休克蛋白90α熒光免疫層析檢測(cè)方法。結(jié)果:1、共篩選出16株單克隆細(xì)胞株,經(jīng)過(guò)亞型篩選以后共選出8株陽(yáng)性細(xì)胞株,編號(hào)分別為3B2、4E3、4F4、5E2、7D1、7E4、8F2、8G4。2、經(jīng)過(guò)8株單抗和多抗配對(duì),挑選出8F2和多抗成為最優(yōu)的一對(duì)配對(duì)抗體。確定了各反應(yīng)條件,最佳反應(yīng)時(shí)間為5min。線性范圍0.39ng/m L-100ng/m L;靈敏度為0.0578ng/ml;精密性質(zhì)控品高值(30ng/m L)CV=7.46%;低值(10ng/m L)CV=8.39%,高、中、低值血清的回收率分別為100.56%、99.76%、94.1%;與國(guó)外HSP90αELISA檢測(cè)試劑盒平行檢測(cè)40份臨床患者血清,結(jié)果顯示兩者相關(guān)系數(shù)為0.9685。結(jié)論:1、通過(guò)單克隆抗體制備的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,成功篩選出8株陽(yáng)性細(xì)胞株,并挑選出一對(duì)配對(duì)抗體用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的研究。2、超聲波技術(shù)在熒光微球活化過(guò)程中可降低聚集現(xiàn)象。3、初步建立的方法具有良好的精密性和線性,臨床符合率能滿足臨床檢測(cè)技術(shù)要求,有望完善后報(bào)批用于臨床。