微透析系統(tǒng)

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目前測定回收率的方法主要有以下幾種：1，外標(biāo)法計(jì)算被測物質(zhì)相對濃度的變化時(shí), 可簡單地采用體外回收率法。測定宜在取樣后立即進(jìn)行, 將探針放入已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液中, 用與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)相同的流速灌流探針。達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)后收集灌流液并進(jìn)行檢測。測定濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度之比就是體外回收率。此法雖簡單易行, 但由于被測物質(zhì)在體外時(shí)與體內(nèi)的環(huán)境狀況不同, 檢測結(jié)果不能嚴(yán)格地等同于實(shí)際的回收率。2，內(nèi)標(biāo)法往灌流液中加入已知濃度且性質(zhì)與被分析物質(zhì)相似的另一種物質(zhì)做內(nèi)標(biāo),內(nèi)標(biāo)物不僅在擴(kuò)散性質(zhì)上與被分析物一致,而且還要在體內(nèi)的代謝過程中也盡可能一致,測出透析率即作為被分析物的回收率。由于選擇內(nèi)標(biāo)的局限性很大, 限制了此法的應(yīng)用。3，反透析法假設(shè)被測物從兩個(gè)方向通過半透膜是同等的。在灌流液中加入一定濃度的內(nèi)標(biāo)物(Cic) ,在與體內(nèi)透析相同的條件下操作, 測定透析液中內(nèi)標(biāo)物的濃度(Cec) ,體內(nèi)回收率(Rin ,vivo ) 可用下式計(jì)算：Rin vivo = (1 Cec/ Cic) ×100 %本法要求內(nèi)標(biāo)物具有生物惰性, 盡可能與被測物相似。

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微透析探針是微透析實(shí)驗(yàn)中重要的組成部分。所有CMA的探針除了線性探針之外，都是采用同心圓的結(jié)構(gòu)來制作的。探針兩個(gè)端口，入口端和出口端。一個(gè)內(nèi)部的導(dǎo)管能使灌流液從探針的入口端直接流到探針的頂端，隨之灌流液則會(huì)充滿半透膜和導(dǎo)管之間的區(qū)域，之后灌流液繼續(xù)沿著外管從出口流出。探針的所有金屬部分都經(jīng)過預(yù)處理以防止灌流液中的易變成分發(fā)生氧化。

清醒的動(dòng)物在做CNS的微透析實(shí)驗(yàn)時(shí)，在植入探針之前需要在動(dòng)物醉狀態(tài)下先植入-個(gè)套管，等大鼠清醒要插入探針時(shí)，可以把套管中的假探針拔出，再插入真正的探針開始實(shí)驗(yàn)，這樣就不用在動(dòng)物時(shí)就植入探針，保證探針的使用效率。

微透析在腦科學(xué)中的應(yīng)用

腦部微透析是利用微透析技術(shù)對特定腦部區(qū)域進(jìn)行連續(xù)灌注采樣，用于動(dòng)態(tài)監(jiān)測動(dòng)物大腦內(nèi)源性和外源性物質(zhì)細(xì)胞外含量的變化的新技術(shù)。該技術(shù)常與電化學(xué)檢測、熒光、測定等系統(tǒng)聯(lián)合，對離子、單胺類、氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)、能量物質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的濃度變化監(jiān)測。由于具有連續(xù)取樣、動(dòng)態(tài)觀察、定量分析、采樣量小等特點(diǎn)，在神經(jīng)科學(xué)的領(lǐng)域中已獲得越來越廣泛的應(yīng)用。微透析系統(tǒng)結(jié)合電生理、光遺傳、行為學(xué)等研究手段同時(shí)檢測，同步地不同數(shù)據(jù)進(jìn)行記錄分析。