弓形桿菌屬通用PCR試劑盒
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上海滬崢生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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用途范圍 限科研
純度 詳詢(xún)客服%
產(chǎn)地 國(guó)內(nèi)
品牌 上海滬崢
規(guī)格 50T/盒
貨號(hào) HZT0456
是否進(jìn)口
商品介紹

上海滬崢專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)銷(xiāo)售弓形桿菌屬通用PCR試劑盒現(xiàn)貨,

本試劑盒引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,反應(yīng)特異性強(qiáng),即開(kāi)即用,歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu)。,本試劑盒引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,反應(yīng)特異性強(qiáng),即開(kāi)即用,歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu)。

產(chǎn)品詳細(xì)信息

中文名稱(chēng):弓形桿菌屬通用PCR試劑盒

英文名稱(chēng):Arcobacter spp.

產(chǎn)品規(guī)格:50T/盒

用途】用于弓形桿菌屬的檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò)5次,有效期12個(gè)月。

提示:本品僅用于科研實(shí)驗(yàn),不能用作醫(yī)療及臨床診斷。

弓形桿菌屬通用PCR試劑盒使用方法

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1 樣本前處理

組織樣品:每份組織分別從3個(gè)不同的位置稱(chēng)取樣品約1g,手術(shù)剪剪碎混勻后取0.5g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至1.5mL滅菌離心管中,8000rpm離心2min,取上清液100μL于1.5mL滅菌離心管中;液體樣品,直接取100μL提取

 

1.2 DNA提取

1) DNA的提取也可以采用(離心柱提取法),請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作

2. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟1提取的DNA、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

 

3. PCR擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))

4.1 將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量PCR儀反應(yīng)槽內(nèi);

4.2 設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置25μL;

熒光通道選擇: 檢測(cè)通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI系列儀器請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光,選擇None即可。

4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:

步驟

循環(huán)數(shù)

溫度

時(shí)間

收集熒光信號(hào)

1

1 cycle

95

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55

30sec

 

4. 結(jié)果分析判定

5.1 結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置BaselineThreshold一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線(xiàn)出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baselinestart值(一般可在3~15范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop值(一般可在5~20范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及Threshold的Value值(上下拖動(dòng)閾值線(xiàn)至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。

 

5.2 結(jié)果判斷

陽(yáng)性:檢測(cè)通道Ct值≤35,且曲線(xiàn)有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線(xiàn);

可疑:檢測(cè)通道35<Ct值≤38,建議重復(fù)檢測(cè),如果檢測(cè)通道仍為35<Ct值≤38,且曲線(xiàn)有明顯的增長(zhǎng)曲線(xiàn),判定為陽(yáng)性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果Ct值>38或無(wú)Ct值。

 

5. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品:Ct>38或無(wú)Ct值顯示;

陽(yáng)性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線(xiàn)有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,且Ct值≤32;

以上條件應(yīng)同時(shí)滿(mǎn)足,否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

 

6. 檢測(cè)方法的局限性

樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);

樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;

陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;

病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;

試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果;

本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。

弓形桿菌屬通用PCR試劑盒

 注意事項(xiàng)
1.本試劑檢測(cè)靈敏度高。為了防止污染,實(shí)驗(yàn)要分區(qū)操作。
   1)*區(qū):樣本制

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公司名稱(chēng) 上海滬崢生物科技有限公司
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