上海滬崢生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品, PCR檢測(cè)試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細(xì)胞
弓形桿菌屬通用PCR試劑盒
價(jià)格
訂貨量(盒)
¥1380.00
≥1
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經(jīng)營(yíng)模式
生產(chǎn)商,貿(mào)易商,
所在地區(qū)
上海市奉賢區(qū)
主營(yíng)產(chǎn)品
ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品, PCR檢測(cè)試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細(xì)胞
上海滬崢專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)銷(xiāo)售弓形桿菌屬通用PCR試劑盒現(xiàn)貨,
本試劑盒引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,反應(yīng)特異性強(qiáng),即開(kāi)即用,歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu)。,本試劑盒引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,反應(yīng)特異性強(qiáng),即開(kāi)即用,歡迎新老客戶(hù)咨詢(xún)訂購(gòu)。
產(chǎn)品詳細(xì)信息
中文名稱(chēng):弓形桿菌屬通用PCR試劑盒
英文名稱(chēng):Arcobacter spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T/盒
用途】用于弓形桿菌屬的檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò)5次,有效期12個(gè)月。
提示:本品僅用于科研實(shí)驗(yàn),不能用作醫(yī)療及臨床診斷。
弓形桿菌屬通用PCR試劑盒使用方法
1. 樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1 樣本前處理
組織樣品:每份組織分別從3個(gè)不同的位置稱(chēng)取樣品約1g,手術(shù)剪剪碎混勻后取0.5g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至1.5mL滅菌離心管中,8000rpm離心2min,取上清液100μL于1.5mL滅菌離心管中;液體樣品,直接取100μL提取
1.2 DNA提取
1) DNA的提取也可以采用(離心柱提取法),請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。
2. 加樣(樣本處理區(qū))
將步驟1提取的DNA、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
3. PCR擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
4.1 將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量PCR儀反應(yīng)槽內(nèi);
4.2 設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為25μL;
熒光通道選擇: 檢測(cè)通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,ABI系列儀器請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光,選擇None即可。
4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟 | 循環(huán)數(shù) | 溫度 | 時(shí)間 | 收集熒光信號(hào) |
1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
2 | 40 cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
55℃ | 30sec | 是 |
4. 結(jié)果分析判定
5.1 結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置Baseline和Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線(xiàn)出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline的start值(一般可在3~15范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop值(一般可在5~20范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及Threshold的Value值(上下拖動(dòng)閾值線(xiàn)至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。
5.2 結(jié)果判斷
陽(yáng)性:檢測(cè)通道Ct值≤35,且曲線(xiàn)有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線(xiàn);
可疑:檢測(cè)通道35<Ct值≤38,建議重復(fù)檢測(cè),如果檢測(cè)通道仍為35<Ct值≤38,且曲線(xiàn)有明顯的增長(zhǎng)曲線(xiàn),判定為陽(yáng)性,否則為陰性;
陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果Ct值>38或無(wú)Ct值。
5. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品:Ct>38或無(wú)Ct值顯示;
陽(yáng)性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線(xiàn)有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期,且Ct值≤32;
以上條件應(yīng)同時(shí)滿(mǎn)足,否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
6. 檢測(cè)方法的局限性
? 樣本檢測(cè)結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān);
? 樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;
? 陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏,會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果;
? 病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
? 不同的提取方法存在提取效率差異,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
? 試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果;
? 本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段。
弓形桿菌屬通用PCR試劑盒
◆ 注意事項(xiàng)
1.本試劑檢測(cè)靈敏度高。為了防止污染,實(shí)驗(yàn)要分區(qū)操作。
1)*區(qū):樣本制