小鼠（GP-II）elisa檢測試劑盒的原理：

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。ELISA試劑盒在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體。

【生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則】
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。

【試劑盒特點】

A. 分子量大。合成肽采用化學(xué)方法制備，由于工藝的局限，合成數(shù)量有限，只能達(dá)到數(shù)百個氨基酸;而利用基因工程制備的抗原，分子量更大。
B. 穩(wěn)定性好。人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒包被的抗原的穩(wěn)定性可使試劑盒的效期得到保證，早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只3-4個月，采用基因工程抗原后效期大大延長了。
C. 基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇，可提高試劑盒的靈敏度，提高檢出率。
D. 純化難度大?；蚬こ炭乖募兓夹g(shù)難度較大。
合成多肽抗原是根據(jù)蛋白質(zhì)抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。合成肽抗原有以下特點： a.分子量太小;b.一般只含有一個抗原決定簇;c.純度高;d.穩(wěn)定性差。

【實驗注意事項】

一、標(biāo)本收集體積 100μl 。當(dāng)天進(jìn)行實驗標(biāo)本儲存在4℃備用。標(biāo)本2-8℃可以保存48小時；-20℃可以保存1個月，-70℃可以保存309個月。標(biāo)本避免反復(fù)凍融。
二、血清標(biāo)本采集避免溶血。紅細(xì)胞溶解時會釋放具有過氧化物酶活性物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。
三、標(biāo)本宜在新鮮時代測。保存時間過長的樣本可能發(fā)生聚合，ELISA實驗中會使本底加深。
四、反復(fù)凍融會使蛋白效價降低，樣本可以少量分裝保存或者適當(dāng)加入防腐劑。
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ELISA檢測范圍準(zhǔn)確，質(zhì)量可靠，靈敏度高，產(chǎn)品優(yōu)點操作簡.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,*限度的節(jié)省實驗經(jīng)費.

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