產(chǎn)品名稱：

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型檢測(cè)試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）

規(guī)    格： 50T
檢測(cè)方法： 實(shí)時(shí)熒光 PCR

保存方式： 2~8℃

有 效 期： 1年

產(chǎn)    地： 中國(guó)

用    途： 僅用于科研實(shí)驗(yàn)

豬圓環(huán)病毒Ⅱ型檢測(cè)試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）

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豬圓環(huán)病毒Ⅱ型檢測(cè)試劑盒（實(shí)時(shí)熒光PCR法）

利用ELISA進(jìn)行檢驗(yàn)常見的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。

1、抗原：ELISA抗原有三類：液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。

純度不高可導(dǎo)致試劑盒的特異性不強(qiáng)，合成抗原一般都是多肽抗原，

試劑盒一般為基因重組抗原。抗原純度不高，特異性就不強(qiáng)，

2、抗體特異性和親和力的大小會(huì)影響試劑盒的特異性和敏感性

3、酶結(jié)合物，試劑盒的保存時(shí)間通常由酶的穩(wěn)定性決定。

最常用的就是辣根過(guò)氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。

ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液（PBS）

堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了，因?yàn)闅埩舻腜BS會(huì)抑制一半的酶活性。

TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(yīng)（OPD對(duì)機(jī)體有突變作用，所以改用TMB）

◆ 注意事項(xiàng)
1．本試劑檢測(cè)靈敏度高。為了防止污染，實(shí)驗(yàn)要分區(qū)操作。
   1）第一區(qū)：樣本制備區(qū)。
 2）第二區(qū)：模板添加區(qū)。
   3）第三區(qū)：擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)。
   ★ 分區(qū)之間*進(jìn)行物理性隔離，避免人為因素造成的污染。
2．實(shí)驗(yàn)過(guò)程中穿戴工作服和乳膠手套，不同區(qū)域獨(dú)立使用工具，需更換手套和實(shí)驗(yàn)服。
3．嚴(yán)格按照操作步驟操作，試劑配制和加樣等步驟請(qǐng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求在冰盒上操作。
4．反應(yīng)液中的成分對(duì)光敏感，應(yīng)避光保存。試劑使用前要完全解凍，但應(yīng)避免反復(fù)凍融，推薦使用前離心30秒，并按檢測(cè)頻次將反應(yīng)液以適當(dāng)體積分管保存。
5．反應(yīng)結(jié)束后，擴(kuò)增管請(qǐng)置于密封袋內(nèi)丟棄，當(dāng)日清理，開蓋易造成氣溶膠污染，禁止開蓋。
6．不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿混合使用，在有效期內(nèi)使用。

結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置基線（baseline）：一般情況下，對(duì)ABI 7500、7700等儀器設(shè)為6-15cycle，對(duì)PE5700設(shè)為3-15cycle,對(duì)MJ Research Option2設(shè)為6-12cycle。特殊情況可對(duì)基線適當(dāng)調(diào)整。
設(shè)置閾值（threshold）:以閾值線剛超過(guò)陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線（無(wú)規(guī)則的噪音線）的zui高點(diǎn)。
結(jié)果判斷
陽(yáng)性：檢測(cè)樣本Ct值小于等于35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)期；
可疑：檢測(cè)樣本Ct值大于35.0且小于40.0，重復(fù)一次實(shí)驗(yàn)，如果Ct值仍小于40.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)期，為陽(yáng)性，否則為陰性；
陰性：檢測(cè)不到樣本Ct值或Ct值為40。