小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）elisa檢測試劑盒的原理：

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。ELISA試劑盒在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體。

ELISA試劑盒樣本收集以及處理方法：

液體類標(biāo)本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
A、檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細(xì)收集上清。
B、檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5）組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）elisa檢測試劑盒標(biāo)本的稀釋原則：
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。*計算濃度時，稀釋了“N”倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

【生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則】
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。

【實驗注意事項】

一、標(biāo)本收集體積 100μl 。當(dāng)天進行實驗標(biāo)本儲存在4℃備用。標(biāo)本2-8℃可以保存48小時；-20℃可以保存1個月，-70℃可以保存309個月。標(biāo)本避免反復(fù)凍融。
二、血清標(biāo)本采集避免溶血。紅細(xì)胞溶解時會釋放具有過氧化物酶活性物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。
三、標(biāo)本宜在新鮮時代測。保存時間過長的樣本可能發(fā)生聚合，ELISA實驗中會使本底加深。
四、反復(fù)凍融會使蛋白效價降低，樣本可以少量分裝保存或者適當(dāng)加入防腐劑。
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小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體（AT-Ⅲ）elisa檢測試劑盒新產(chǎn)品：

小鼠HO-2   elisa檢測試劑盒    Mouse heme oxygenase 2,HO-2 ELISA試劑盒    

小鼠Cr elisa檢測試劑盒    Mouse Crosslaps,Cr ELISA試劑盒    

小鼠FSH elisa檢測試劑盒    mouse follicle-stimulating hormone,FSH ELISA試劑盒    

小鼠CⅠCP elisa檢測試劑盒    Mouse cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA試劑盒    

小鼠DPD elisa檢測試劑盒    Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA試劑盒    

小鼠PY elisa檢測試劑盒    Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA試劑盒    

小鼠OPN elisa檢測試劑盒    Mouse Osteopontin,OPN ELISA試劑盒    

小鼠ACTH elisa檢測試劑盒    mouse adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA試劑盒    

小鼠ALP-B elisa檢測試劑盒    Mouse Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA試劑盒    

小鼠TFR/CD71 elisa檢測試劑盒    Mouse transferrin receptor,TFR ELISA試劑盒    

小鼠Cys-C elisa檢測試劑盒    Mouse Cystatin C,Cys-C ELISA試劑盒    

小鼠FⅧAg elisa檢測試劑盒    Mouse Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA試劑盒    

小鼠M2-PK elisa檢測試劑盒    Mouse Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA試劑盒    

小鼠PRL elisa檢測試劑盒    mouse prolactin,PRL ELISA試劑盒    

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