本試劑盒用一對轉(zhuǎn)基因件NOS啟動子PCR試劑盒特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR技術(shù)對禽白血病病毒進行體外擴增檢測
【儲存條件及有效期】

-20℃避光保存、運輸、避免反復凍融，有效期12個月。

【適用儀器】

ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。

上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售轉(zhuǎn)基因件NOS啟動子PCR試劑盒現(xiàn)貨，

本試劑盒引物經(jīng)過優(yōu)化，反應特異性強，即開即用，歡迎新老客戶咨詢訂購。，本試劑盒引物經(jīng)過優(yōu)化，反應特異性強，即開即用，歡迎新老客戶咨詢訂購。

產(chǎn)品詳細信息

中文名稱：禽白血病病毒通用RTPCR試劑盒

英文名稱：Avian Infectious Laryngotracheitis Virus(AILTV)

產(chǎn)品規(guī)格：50T/盒

用途】用于禽白血病病毒的檢測、診斷和流行病學調(diào)查。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融次數(shù)不超過5次，有效期12個月。

提示：本品僅用于科研實驗，不能用作醫(yī)療及臨床診斷。

轉(zhuǎn)基因件NOS啟動子PCR試劑盒使用方法

【使用方法】

1. 樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1 樣本前處理

組織：取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿，勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中；
液體標本：取適量標本13000rpm離心2min，棄上清。
1.2 DNA提取

1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液，100℃恒溫處理10分鐘，13,000 rpm離心5分鐘，取上清液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2. 試劑配制（試劑準備區(qū)）
轉(zhuǎn)基因件NOS啟動子PCR試劑盒

實驗操作

1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進行）
剪下所需測試數(shù)的已含有反應液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應液中分別加入5μL模板，順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進行PCR擴增反應。
3. 擴增反應（擴增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團選擇FAM，淬滅基團選擇TAMRA。

6. 檢測方法的局限性

? 樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關；

? 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

? 陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏，會導致假陽性結(jié)果；

? 病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結(jié)果；

? 不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結(jié)果；

? 試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結(jié)果；

? 本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

轉(zhuǎn)基因件NOS啟動子PCR試劑盒

◆ 注意事項
1．本試劑檢測靈敏度高。為了防止污染，實驗要分區(qū)操作。
   1）*區(qū)：樣本制備區(qū)。
 2）*區(qū)：模板添加區(qū)。
   3）第三區(qū)：擴增及產(chǎn)物分析區(qū)。
   ★ 分區(qū)之間*進行物理性隔離，避免人為因素造成的污染。
2．實驗過程中穿戴工作服和乳膠手套，不同區(qū)域獨立使用工具，需更換手套和實驗服。
3．嚴格按照操作步驟操作，試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰盒上操作。
4．反應液中的成分對光敏感，應避光保存。試劑使用前要完全解凍，但應避免反復凍融，推薦使用前離心30秒，并按檢測頻次將反應液以適當體積分管保存。
5．反應結(jié)束后，擴增管請置于密封袋內(nèi)丟棄，當日清理，開蓋易造成氣溶膠污染，禁止開蓋。
6．不同批號試劑請勿混合使用，在有效期內(nèi)使用。