邦景小鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA檢測試劑盒
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需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
產(chǎn)品名稱:小鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:MIF
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
B細胞活化因子受體抗體GPR22 ELISA KitAlias: GPR22ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
防御素β1/Defensin β1抗體GPR35(G-protein coupled receptor 35) ELISA KitAlias: Gproteincoupledreceptor35|GPR35|KYNAreceptor|KynurenicacidreceptorELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml
骨涎蛋白抗體GPR58/TAAR2 ELISA KitAlias: GPR58ELISAKit,TAAR2ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
刺激分子B7-1蛋白抗體GPR50 ELISA KitAlias: GPR50ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
Bcl2 beta蛋白抗體GPR105 ELISA KitAlias: GPR105ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
轉錄因子MYB相關蛋白B抗體GPR81 ELISA KitAlias: GPR81ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
腫瘤/睪丸抗原27抗體(高遷移率族蛋白)GPR107 ELISA KitAlias: GPR107ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
B細胞淋巴瘤蛋白3抗體GPR108 ELISA KitAlias: GPR108ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
支鏈氨基酸轉氨酶2抗體GPR116(G-protein coupled receptor 116) ELISA KitAlias: Gproteincoupledreceptor116|GPR116|KIAA0758|KPG_001ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml
BCL2相關蛋白A1抗體GPR123 ELISA KitAlias: GPR123ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
BAP31蛋白抗體GP repeat ELISA KitAlias: GPrepeatELISAKitReactivity: HumanRange: Required
B7H6蛋白抗體GPAA1 ELISA KitAlias: GPAA1ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
β亞基絨毛膜促性腺激素(β HCG)抗體GPATCH2 ELISA KitAlias: GPATCH2ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
p53正向細胞凋亡調控因子抗體GPBP1 ELISA KitAlias: GPBP1ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
脊髓小腦共濟失調蛋白BEAN1抗體GPATCH4(G patch domain-containing protein 4) ELISA KitAlias: GPATC4|Gpatchdomain-containingprotein4|GPATCH4ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml
小鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA檢測試劑盒3-O-沒食子酰粘酸3"-O-Galloylmucic acid中藥標準品 CAS NO.: 143202-36-2 分 子 式: C11H9N3O2.Na 分 子 量: 238.19786儲存條件: 2-8℃檢測方法: HPLC≥98%
苦瓜皂苷 C7beta-(beta-glucopyranosyloxy)-3beta-hydroxycucurbita-5,23,25-trien-19-al化學標準品CAS NO.: 1041631-93-9 分 子 式: C36H56O8 分 子 量: 616.825
二氫膽固醇5-α-cholestan-3-β-ol中藥標準品 CAS NO.: 80-97-7 分 子 式: C27H48O 分 子 量: 388.67 熔點: 142-143比旋光度: (CHCl3)+27.4儲存條件: 2-8℃來源: 膽汁
商陸皂苷T中藥標準品 CAS NO.: 分 子 式: 分 子 量: 儲存條件: 2-8℃檢測方法: HPLC≥98%
甲基丁香酚Methyl eugenol中藥標準品 CAS NO.: 93-15-2 分 子 式: C11H14O2 分 子 量: 178.23 儲存條件: 2-8℃檢測方法: HPLC≥98%
梭砂貝母酮堿;新貝甲素Cevan-6-one,3-hydroxy-, (3b,5a,17b)-中藥標準品 CAS NO.: 96997-98-7 分 子 式: C27H43NO2 分 子 量: 儲存條件: 2-8℃檢測方法: HPLC≥98%
2-乙?;蠖∠惴榆?-Acetylacteoside standard中藥標準品 CAS NO.: 94492-24-7 分 子 式: C31H38O16 分 子 量:
豆腐果新苷AHelicianeoide A化學標準品CAS NO.: 496066-82-1 分 子 式: C32H38O19 分 子 量: 726.637儲存條件: 2-8℃外觀: Yellow powder
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。