需自備試劑和器材：

1． 標準規(guī)格酶標儀。

2． 自動洗板機。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙 

產(chǎn)品名稱：小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA檢測試劑盒

英文名稱：Cyclin-D2

規(guī)格：96T/48T

特點：靈敏性高、特異性強、重復性好

用途:科研實驗等領域科學研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等

實驗步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復，常采用高壓、微波（溫

度達到 98~100℃）或酶消化修復法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復，

直接進入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復染：自來水充分沖洗，復染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

C型凝集素4家族E抗體SIRT1(Sirtuin 1) ELISA KitAlias: SIRT1|SIR2alpha|SIR2L1|SIR2-likeprotein1|EC3.5.1|S.cerevisiae|homolog)1|sirtuin1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

毒蕈堿型乙酰膽堿受體抗體SLC(Secondary Lymphoid Tissue Chemokine) ELISA KitAlias: SLC|CCL21|6Ckine|CKb9|ECL|SCYA21|TCA4ELISAKitReactivity: HumanRange: 78.125-5000pg/mlSensitivity: 46.875pg/ml

促進凋亡基因抗體SIRPa(Signal Regulatory Protein Alpha) ELISA KitAlias: SIRPa|BIT|CD172a|MFR|MYD-1|SHPS1|SIRPA|Bit|BITbrain-immunoglobulin-likemoleculewithtyrosine-basedactivationmotifs|BrainIg-likemoleculewithtyrosine-basedactivationmotifs|CD172antigen-likefamilymemberA|CD172a|CD172aantigen|InhibitoryreceptorSHPS-1|Macrophagefusionreceptor|MFRtyrosinephosphataseSHPsubstRate1|MYD1|MYD-1|MyD-1antigen|p84|P84|proteintyrosinephosphatase|non-receptortypesubstRate1|PTPNS1|SHPsubstRate1|SHPS-1|SHPS1CD172A|signal-regulatoryproteinalpha|Signal-regulatoryproteinalpha-1|Signal-regulatoryproteinalpha-2|Signal-regulatoryproteinalpha-3|SIRPalpha|SIRP-ALPHA-1|Sirp-alpha-1|SIRPalpha2|Sirp-alpha-2|Sirp-alpha-3|SIRPtyrosine-proteinphosphatasenon-receptortypesubstRate1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體RNASET2(Ribonuclease T2) ELISA KitAlias: RNASET2|RNASE6PL|RibonucleaseT2|Ribonuclease6ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

細胞角蛋白19抗體SLC16A8(Solute Carrier Family 16, Member 8) ELISA KitAlias: SLC16A8|REMP|SLC16A8|MCT3MCT3|monocarboxylatetransporter3|REMP|solutecarrier16(monocarboxylicacidtransporters)|member8|Solutecarrierfamily16member8|solutecarrierfamily16|member8(monocarboxylicacidtransporter3)ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.625-40ng/mlSensitivity: 0.375ng/ml

細胞角蛋白2抗體Sec23b(protein transport protein Sec23B) ELISA KitAlias: Sec23b|SEC23-relatedproteinB|SEC23BELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

細胞角蛋白4抗體RTN4(Reticulon 4) ELISA KitAlias: RTN4|Reticulon-5|RTN-x|Neuroendocrine-specificproteinChomolog|Neuroendocrine-specificprotein(NSP)|Foocen|Neuriteoutgrowthinhibitor(Nogoprotein)|ELISAKitReactivity: HumanRange: 78.125-5000pg/mlSensitivity: 46.875pg/ml

補體C1qTNF9鏈多肽抗體RPS6Kβ1(Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA KitAlias: RPS6Kβ1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

5號染色體開放閱讀框34抗體rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA KitAlias: rT3ELISAKitReactivity: HumanRange: 93.75-6000pg/mlSensitivity: 56.25pg/ml

E1A激活基因刺激蛋白1抗體SCG2(Secretogranin II) ELISA KitAlias: SCG2|CHGC|EM66|SN|SgII|Chromogranin-C|Secretogranin-2ELISAKitReactivity: HumanRange: 1.25-80ng/mlSensitivity: 0.75ng/ml

2號染色體開放閱讀框42抗體RXFP1(Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) ELISA KitAlias: RXFP1|Leucine-richrepeat-containingG-proteincoupledreceptor7|Relaxinfamilypeptidereceptor1|LGR7|LGR7|RXFP1|RXFPR1|leucine-richrepeat-containingGprotein-coupledreceptor7|Leucine-richrepeat-containingG-proteincoupledreceptor7|Relaxinfamilypeptidereceptor1|relaxinreceptor1|relaxin|insulin-likefamilypeptidereceptor1|RXFPR1ELISAKitReactivity: HumanRange: 15.625-1000pg/mlSensitivity: 9.375pg/ml

中心體蛋白110抗體RNASE(Ribonuclease) ELISA KitAlias: RNASEELISAKitReactivity: HumanRange: 78.125-5000pg/mlSensitivity: 46.875pg/ml

克侖特羅/瘦肉精抗體SDH(Succinate Dehydrogenase) ELISA KitAlias: SDHELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

纖維素酶RNASEN(Ribonuclease III, Nuclear) ELISA KitAlias: RNASEN|p241|ProteinDrosha|RibonucleaseIII(RNaseIII)|RN3|RNASE3L|RNASENELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

3號染色體開放閱讀框54抗體sdLDL(Small Dense Low Density Lipoprotein) ELISA KitAlias: sdLDLELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20nmol/mlSensitivity: 0.188nmol/ml
小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA檢測試劑盒二氫歐山芹醇當歸酸酯Columbianadin中藥標準品 CAS NO.: 5058-13-9 分 子 式: C19H20O5 分 子 量: 328.3591熔點:  119-120  比旋光度:  (CHCl3)+272  儲存條件:  2-8℃ 檢測方法:  HPLC≥98% 

紫杉素 BTaxinin B對照藥材CAS NO.: 18457-44-8 分 子 式:  分 子 量:

氯霉素溶液(Chloramphenicol,34mg/ml)標準滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

甘露醇D-Mannitol中藥標準品 CAS NO.: 69-65-8 分 子 式: C6H14O6 分 子 量: 182.17176熔點:  167-170 比重:  1.5047 比旋光度:  (c, 17.6 in H2O)-0.21；(c, 10 in 12.8% borax aq.)+28.61儲存條件:  RT 

新藤黃酸Gambogenic acid化學標準品CAS NO.: 173932-75-7 分 子 式:  分 子 量: 儲存條件:  2-8℃檢測方法:  HPLC≥98%來源:  Constit. of Gamboge (Garcinia hanburyi)外觀:  黃色

異烏藥內酯Linderalactone中藥標準品 CAS NO.: 728-61-0 分 子 式: C15H16O3 分 子 量: 244.28574

Western封閉液標準滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

2,6-二氯苯腈2,6-Dichlorobenzonitrile化學標準品CAS NO.: 1194-65-6 分 子 式: C7H3NCl2 分 子 量: 172.01142熔點:  143-146°C
樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。

仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。