ELISA檢測概述
      ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒是以免疫學反應為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實驗技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名稱：人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA
英文名稱：Human Cyclin-D2 Elisa Kit
貨號：BH-H6601
規(guī)格：48T/96T
自備物品:
1.     酶標儀（450nm）
2.     高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.     37℃恒溫箱

應用范圍：血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體（本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途）
     人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3． 各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請避光保存。
7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟:
1.        標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在第一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。
2.         加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.         溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.         配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5.         洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.         溫育：操作同3。
8.         洗滌：操作同5。
9.         顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.     測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
Ac-RLR-AMC  Z-GGL-β NA  Pyr-PR-pNA  Orexin B (human)  Ovalbumin (323-339)(chicken, japanese quail)

Ac-Nle-Pro-Nle-Asp-AMC  Z-GGL-pNA  Pyr-Val-OH  (Ala11,D-Leu15)-Orexin B(human)  Ovalbumin (358-365)(chicken)

Boc-LRR-AMC  Z-LLG-AMC  Obestatin (human)  Orexin B (mouse, rat)  Carbetocin,(Butyryl1,Tyr(Me)2)-1- Carbaoxytocin

Boc-LSTR-AMC  Z-LLG-β NA  Obestatin (rat)  Orphan GPCR SP9155 Agonist P518 (human)  Neuronostatin-13 (human, canine, porcine)

Boc-VGR-AMC  Z-VLR-4Mβ NA  DOTA-(Tyr3)-Octreotate  Orphan GPCR SP9155 Agonist P550 (mouse)  (Des-Bromo)-NeuropeptideB (1-23) (human)
皂土(膨潤土)(Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑)  Bentonite  質(zhì)量規(guī)格：Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑 犬透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 Canine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit

皂土(膨潤土)(Bentone SD-2,適于中高極性溶劑)  Bentonite  質(zhì)量規(guī)格：Bentone SD-2,適于中高極性溶劑 犬透明質(zhì)酸酶1(HAase 1)試劑盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit

活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：AR,200目,粉末狀,褐色 犬透明質(zhì)酸酶2(HAase 2)試劑盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit

活性炭(CP,200目,粉末狀,褐色)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：CP,200目,粉末狀,褐色 犬透明質(zhì)酸酶3(HAase 3)試劑盒 Canine Hyaluronidase 3,HAase 3 ELISA Kit

活性炭顆粒(AR,20-50目)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：AR,20-50目 犬透明質(zhì)酸酶4(HAase 4)試劑盒 Canine Hyaluronidase 4,HAase 4 ELISA Kit

活性炭(電鍍脫色專用,200目,from wood)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：電鍍脫色專用,200目,from wood 犬維生素A(VA)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T

活性炭(催化劑載體專用,8-16目)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：催化劑載體專用,8-16目 犬維生素A(VA)試劑盒 Dog Vitamin A,VA ELISA Kit

活性炭(凈水、氣體化專用,棒,φ1.0mm)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：凈水、氣體化專用,棒,φ1.0mm 犬維生素E(VE)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminE,VEELISAKit 96T/48T

活性炭(凈水、氣體化專用,10-24目)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：凈水、氣體化專用,10-24目 犬維生素E(VE)試劑盒 Canine Vitamin E,VE ELISA Kit

活性炭(電鍍脫色專用,40-60目,from Nutshell)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：電鍍脫色專用,40-60目,from Nutshell 犬維生素K1(VK1)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T
人細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAStavudine  3056-17-5  中文名：司他夫定  分子式：C10H12N2O4    HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASAELISAKit 人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Albendazole  54965-21-8  中文名：阿苯達唑  分子式：C12H15N3O2S    Humancytokeratin20,CK-20ELISA試劑盒人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  175291-56-2  中文名：Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯  分子式：C26H26NO8P    組織HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性檢測試劑盒20次

8-Phenyloctanol  10472-97-6  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O    HumanPlateletFactor4,PF-4ELISAKit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

8-Phenyloctanoic acid  26547-51-3  中文名：8-苯基辛酸  分子式：C14H20O2    兔子脂聯(lián)素(ADP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Deoxycholic acid  83-44-3  中文名：去氧膽酸  分子式：C24H40O4    Human neonatal thyroid stimulating hormone (N-TSH) ELISA Kit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)ELISA試劑盒

Timosaponin AIII  41059-79-4  中文名：知母皂苷AIII  分子式：C39H64O13    Humanpolymyositis-sclerosisaibody,PM-Scl/PM-1ELISAKit 人抗多發(fā)性肌炎硬皮病抗體(PM-Scl/PM-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Diosgenin  512-04-9  中文名：薯蕷皂苷元  分子式：C27H42O3    HumanEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISA試劑盒人腺來源的內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Sarsasapogenin  126-19-2  中文名：菝葜皂苷元  分子式：C27H44O3    組織PIM2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Makisterone A 20,22-monoacetonide  245323-24-4  中文名：  分子式：C31H50O7    humanPepsinogenA,PG-AELISAKit人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T