需自備試劑和器材：

1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2． 自動(dòng)洗板機(jī)。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時(shí)用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙 

產(chǎn)品名稱：大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒

英文名稱：15-LO/LOX

規(guī)格：96T/48T

特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

實(shí)驗(yàn)步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫

度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，

直接進(jìn)入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

Dimethyl yellow分子式：C14H15N3；C6H5N=NC6H4N(CH3)2分子量：225.29  現(xiàn)貨促銷   Sulfadiazine

基黃,對二基偶氮  現(xiàn)貨促銷   Sulfachlorpyridazine

茜素黃R   22436  現(xiàn)貨促銷   Sulfacetamide Sodium

Alizarin yellow R分子式：C13H9N3O5；O2NC6H4N=NC6H3-(OH)CO2H分子量：287.23  現(xiàn)貨促銷   Sulfacetamide

對硝基偶氮水楊或鈉鹽,對硝基偶氮水楊鈉,茜素黃R鈉鹽  現(xiàn)貨促銷   Sulfabenzamide

茜素黃R   22436  現(xiàn)貨促銷   Sucrose Octaacetate

Alizarin yellow R分子式：C13H9N3O5；O2NC6H4N=NC6H3-(OH)CO2H分子量：287.23  現(xiàn)貨促銷   Sucrose

對硝基偶氮水楊或鈉鹽,對硝基偶氮水楊鈉,茜素黃R鈉鹽  現(xiàn)貨促銷   Sucralose

茜素黃R   22436  現(xiàn)貨促銷   Succinylmonocholine Chloride

Alizarin yellow R分子式：C13H9N3O5；O2NC6H4N=NC6H3-(OH)CO2H分子量：287.23  現(xiàn)貨促銷   Succinylcholine Chloride

對硝基偶氮水楊或鈉鹽,對硝基偶氮水楊鈉,茜素黃R鈉鹽  現(xiàn)貨促銷   Succinic Acid

茜素黃R   22436  現(xiàn)貨促銷   Stevioside

Alizarin yellow R分子式：C13H9N3O5；O2NC6H4N=NC6H3-(OH)CO2H分子量：287.23  現(xiàn)貨促銷   Stearyl Alcohol

對硝基偶氮水楊或鈉鹽,對硝基偶氮水楊鈉,茜素黃R鈉鹽  現(xiàn)貨促銷   Stearoyl Polyoxyglycerides

茜素黃GG   5842  現(xiàn)貨促銷   Stearic Acid
大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒2-巰基依托咪酯規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

1,3-丙二醇規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

可的松規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

依托咪酯規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

消旋山莨菪雜質(zhì)I（阿托6β-羥基-3α-托品酯）規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

唑嘌呤雜質(zhì)規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

10-甲氧基-4-（1-甲基-4-基）-4H-并[4.5]環(huán)庚[1.2-b]-4-醇（富馬替芬雜質(zhì)Ⅰ）規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

5-硝基糠醛二乙酯規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

氫溴后馬托品規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

反式帕羅西汀規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

去氟帕羅西汀規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

N-甲基帕羅西汀規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

4-羥基甲規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

4-羥基間二甲規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝

丙戊鎂規(guī)格：96T/48T試劑盒組裝/原裝
樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。

仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。