邦景兔子皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒
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需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應(yīng)加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
產(chǎn)品名稱:兔子皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Cortisol
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學研究,產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
測試底物KLH conjugated synthetic peptide derived from human SRRM1WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SRRM1
脫氧核糖核酸酶 I (凍干)KLH conjugated synthetic peptide derived from human SRRM2ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SRRM2
Activated CT 脫氧核糖核酸KLH conjugated synthetic peptide derived from human SNF1LK2/SIK2WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SNF1LK2/SIK2
穩(wěn)定型螢光基因檢測試劑盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human SGTAWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SGTA
小鼠單克隆 4 (TP6-25.3)KLH conjugated synthetic peptide derived from human SUGT1WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SUGT1
小鼠單克隆 7 (TP4.3.1)KLH conjugated synthetic peptide derived from human SKA3WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SKA3
ADCC報告基因生物活性檢測效應(yīng)細胞KLH conjugated synthetic peptide derived from human SKA2WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SKA2
ADCC報告基因生物活性檢測靶細胞試劑盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human Slc22a5WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500Anti-Slc22a5
核酸(RNA)提取試劑盒KLH conjugated synthetic peptide derived from human SNX27WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SNX27
10x MTS-MSI引物混合液KLH conjugated synthetic peptide derived from human SPDYAWB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500Anti-SPDYA
人大細胞肺癌順鉑耐藥株;NCI-H460/cis 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
人舌鱗癌細胞;SCC15 培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
Cas9穩(wěn)定表達的人胃癌細胞;MKN5-Cas9-526 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS;400ug/ml G418
Cas9穩(wěn)定表達的人宮頸癌細胞;Hela-Cas9-527 培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
兔子皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA檢測試劑盒十二標準溶液(1000μg/mL,溶劑:水) 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,溶劑:水純度:≥98%
磺甲二唑(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
二砜(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,>99.5%純度:≥98%
樂果(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.3%純度:≥97%
三殺螨標準溶液(100μg/ml,u=5%) 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=5%純度:95% 98%
三殺螨標準溶液(10μg/ml,u=6%) 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%純度:≥95%
唑(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.5%純度:98%
二乙二(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
二乙二(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5%(GC)純度:≥98%
十二(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)純度:≥98%
直接藍6(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
分散橙37(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
二乙基錫(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,10ng/μl溶于環(huán)己純度:≥98%
草萘(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品純度:98%
除蟲脲標準溶液(10μg/ml,u=3%) 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=3%純度:≥99%
二噻農(nóng)(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品純度:≥98%
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。