邦景人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA檢測試劑盒
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樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品名稱:人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:PDIA3
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次
10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%
乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫
度達到 98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×
2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),
直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育
30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37
℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
需自備試劑和器材:
1. 標準規(guī)格酶標儀。
2. 自動洗板機。
3. 37℃恒溫箱。
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS 配法為:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽,應(yīng)加上分子式中水的含量。
9. 蒸餾水
10. 吸水紙
調(diào)料D-乳酸比色法定量檢測試劑盒 Hypocrellin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品CAS: 77029-83-5
飲料D-乳酸比色法定量檢測試劑盒 Hyperoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品CAS: 482-36-0
細胞谷氨酸比色法定量檢測試劑盒 Hypericin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品CAS: 548-04-9
乳品谷氨酸比色法定量檢測試劑盒 Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCAS: 112540-82-6
植物游離氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒 Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRCAS: 112955-31-4
通用型維生素E高效液相色譜法定量檢測試劑盒 Hyoscyamine Sulfate Hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口CAS: 620-61-1
石蠟切片軟骨組織番紅safranin染色試劑盒 Hyodeoxycholic acid 質(zhì)量規(guī)格:含量測定CAS: 83-49-8
細胞分化軟骨細胞甲苯胺藍toluidineblue染色試劑盒 Hyodeoxycholic acid 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BRCAS: 83-49-8
細胞分化軟骨細胞阿爾新藍alcianblue染色試劑盒 Hygromycin B 質(zhì)量規(guī)格:羅氏原裝,濃度50mg/mlCAS: 31282-04-9
石蠟切片軟骨組織阿爾新藍alcianblue染色試劑盒 Hygromycin B 質(zhì)量規(guī)格:>90%,粉末,進分CAS: 31282-04-9
脂肪酸β氧化速率比色法檢測試劑盒 Hydroxyzine dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:含量測定CAS: 2192-20-3
大鼠可溶性Toll樣受體2sTLR2定量檢測試劑盒 Hydroxyurea-15N 質(zhì)量規(guī)格:美國進口CAS: 214331-53-0
大鼠可溶性Toll樣受體6sTLR6定量檢測試劑盒 Hydroxyurea/Hydroxycarbamide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品CAS: 127-07-1
大鼠抗核膜糖蛋白抗體gp定量檢測試劑盒 Hydroxyurea/Hydroxycarbamide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCAS: 127-07-1
大鼠胰島素自身抗體IAA定量檢測試劑盒 Hydroxytyrosol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品CAS: 10597-60-1
RanBP1 RAN結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml Diethyl succinate
RanBP2 RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體 0.2ml Diethyl sebacate
ASZ1 錨定蛋白樣蛋白1抗體 0.2ml Docosane
GDAP2 神經(jīng)節(jié)苷脂誘導(dǎo)分相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml Dotriacontane
LRCH1 富含亮重復(fù)家庭蛋白1抗體 0.2ml 1-Heptanol
LRCH2 富含亮重復(fù)家庭蛋白2抗體 0.2ml 4-Hydroxybutanoic acid lactone
LRCH3 富含亮重復(fù)家庭蛋白3抗體 0.2ml γ-Heptalactone
LRCH4 富含亮重復(fù)家庭蛋白4抗體 0.2ml (+)-Fenchone
AGEs 晚期糖基終末產(chǎn)物抗體 0.1ml Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP
Calpastatin 鈣蛋白酶抑制蛋白抗體 0.1ml Saxagliptin monohydrate
TRPC3 色相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml Ganciclovir
RAB7 RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB7抗體 0.1ml Ganciclovir
Septin 2/Sept2/NEDD5 神經(jīng)前體細胞表達發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體 0.1ml 5,6-Dimethoxy-1-indanone
Prkg1/cGKI cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 0.1ml Paeoniflorin
PP2A beta/PPP2CB 蛋白質(zhì)磷酶2B抗體 PP2A β PP2A-β 0.1ml Paeoniflorin
PSCD1 細胞附著蛋白PSCD1抗體 0.1ml Paeoniflorin
4-酰氨基-2-氨基磺 水合物英文名稱: 4-Acetamido-2-aminobenzenesulfonic Acid Hydrate CAS:884-2 分子式:C8H10N2O4S.XH2O 分子量:230.24
3′-酰胺基酮英文名稱: 3′-Acetamidoacetophenone CAS:7463-31-2 分子式:C10H11NO2 分子量:177.2
脒 鹽鹽英文名稱: Acetamidine hydrochloride CAS:1242-5 分子式:C2H6N2.HCl 分子量:94.54
酰胺英文名稱: Acetamide CAS:60-35-5 分子式:CH3CoNH2 分子量:59.07
醛肟英文名稱: Acetaldoxime CAS:107-29 分子式:C2H5NO 分子量:59.07
人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)ELISA檢測試劑盒細胞尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量檢測試劑盒馬來酸羅格列酮
組織尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量檢測試劑盒新生霉素鈉
血液尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量檢測試劑盒納他霉素
細胞尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性熒光定量檢測試劑盒磺胺甲惡唑
組織尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性熒光定量檢測試劑盒鹽酸多柔比星
血液尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性熒光定量檢測試劑盒氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-甲酸鹽
Chymotrypsin西羅莫司
血小板因子3(Plaet Factor III)活性比色法定量檢測試劑盒(+)-松蘿酸