邦景雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒
邦景雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒
邦景雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒
邦景雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒
邦景雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒
邦景雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒

邦景雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒

價(jià)格

訂貨量(盒)

¥4899.00

≥1

聯(lián)系人 陳麗

萦营萨萨萨萨萦萭萪萭萫

發(fā)貨地 上海市閔行區(qū)
進(jìn)入商鋪
掃碼查看

掃碼查看

手機(jī)掃碼 快速查看

在線客服

商品參數(shù)
|
商品介紹
|
聯(lián)系方式
品牌 邦景
產(chǎn)品名稱 雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱 Egg Drop Syndrome Virus-1976(EDSV-76)-1976
貨號 BJP63528
規(guī)格 50次
單位
分類 熒光定量PCR試劑盒
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹

定量PCR方法:

a、競爭法

選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。

b、內(nèi)參照法

在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。

c、PCR-ELISA法

利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測目的。

PCR在分子克隆和DNA分析中有多種用途,下面就向大家介紹PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl 

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒

Egg Drop Syndrome Virus-1976(EDSV-76)-1976

BJP63528

 


熒光定量PCR原理:

產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR最早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。

一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)最終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。


實(shí)時(shí)熒光定量PCR:

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的:

1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí),剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對數(shù)期),此時(shí)微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的。

2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。

外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性最好的定量方法,已得到全世界的公認(rèn),廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。


實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟 

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

       引物1(10pM)               2μl

       引物2(10PM)              2μl

       Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl

      加ddH2O至               50 μl

    視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項(xiàng)

1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。zui好設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。

2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。

3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。

6.產(chǎn)品僅用于科研試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

2,3,4,6-四芐基-D-吡喃葡萄糖 4132-28-9白花前胡甲素鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

7-甲氧基-2-萘滿酮 4133-34-0白花前胡素EDnaJ/Hsp40同源物亞家族C成員12(DNAJC12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

7-甲氧基-2-萘滿酮 4133-34-0白樺酯酸/樺木酸殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體3DL1(KIR3DL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

7-甲氧基-2-萘滿酮 4133-34-0白蠟樹精節(jié)律晝夜蛋白1(PER1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

6-溴-2-四氫萘酮 4133-35-1白藜蘆Clock同源物(CLOCK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

鹽酸賽庚啶 41354-29-4白屈菜紅堿轉(zhuǎn)膠蛋白(TAGLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

鹽酸賽庚啶 41354-29-4白屈菜堿隱花色素1(CRY1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

1-甲氧基-2,3-O-異亞基-5-O -對甲苯磺酰基-beta-D-呋喃核糖苷 4137-56-8白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ配對框基因9(PAX9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

3-哌啶甲酰胺 4138-26-5白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ過氧化還原酶4(PRDX4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

3-哌啶甲酰胺 4138-26-5白頭翁皂苷A3X-射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白6(XRCC6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

2-溴-5-氟吡啶 41404-58-4白頭翁皂苷B4DNA修復(fù)蛋白RAD50(RAD50)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%

2-溴-5-氟吡啶 41404-58-4白鮮堿髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(IREM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%

O-甲基-L-蘇氨酸 4144-02-9白楊素印度刺猬因子(IHH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

Belinostat (PXD101) 414864-00-9斑蝥素POTE錨蛋白域家族成員G(POTEG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥98%

1-溴-4-n-丁基苯 41492-05-1貝母素甲Neudesin神經(jīng)營養(yǎng)因子(NENF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%
雞減蛋綜合征病毒RT-1976探針法熒光定量PCR試劑盒脫羧氯雷他定/地氯雷他定  現(xiàn)貨供應(yīng)   :HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品

脫羧氯雷他定/地氯雷他定  現(xiàn)貨供應(yīng)   :>98%,BR

脫羧環(huán)丙沙星  現(xiàn)貨供應(yīng)   HPLC>98%,S構(gòu)型,標(biāo)準(zhǔn)品

脫水長春堿  現(xiàn)貨供應(yīng)   HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

脫水長春花堿二硫酸鹽  現(xiàn)貨供應(yīng)   HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

脫水淫羊藿素  現(xiàn)貨供應(yīng)   HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯  現(xiàn)貨供應(yīng)   HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

脫水穿心蓮內(nèi)酯  現(xiàn)貨供應(yīng)   >98%,選擇性的ALK抑制劑

脫氫紫堇堿;去氫紫堇堿  現(xiàn)貨供應(yīng)   :HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

脫氫吲達(dá)帕  現(xiàn)貨供應(yīng)   HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

脫氫乙酸(>98%,BR)  現(xiàn)貨供應(yīng)   :HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

脫氫鹽酸尼卡地平  現(xiàn)貨供應(yīng)   HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

肉豆蔻對照藥材英文名稱:Capsaicin:20mg保存:-20℃,避光

忍冬藤對照藥材英文名稱:Isofraxidin:20mg保存:-20℃,避光

三棱對照藥材英文名稱:Ethyl p-methoxycinnamate:50mg保存:-20℃,避光

山藥對照藥材英文名稱:Methyl nonyl ketone:0.1ml保存:-20℃,避光

水蛭對照藥材英文名稱:D- anhydrous glucose:100mg保存:-20℃,避光

石菖蒲對照藥材英文名稱:Patchouli oil:1ml保存:-20℃,避光

蘇木對照藥材英文名稱:Yunnan Baiyao control:10mg保存:-20℃,避光

伸筋草對照藥材英文名稱:1, 8 - two hydroxy anthraquinone:50mg保存:-20℃,避光

腦心浸液瓊脂(BHIA)Catechu兒茶染料法PCR鑒定試劑盒Brain Heart infusion Agar250g

Pfizer腸球菌選擇性瓊脂(PSE瓊脂)Rhizoma pinelliae preparatum法半夏染料法PCR鑒定試劑盒  Pfizer Enterococcus Selective Agar250g

6.5%NaCl葡萄糖瓊脂F(xiàn)olium sennae 番瀉葉染料法PCR鑒定試劑盒    6.5% NaCl Dextrose Agar250g

哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)(改良)Radix saposhnikoviae防風(fēng)染料法PCR鑒定試劑盒   250g

乙基紫疊氮鈉肉湯(litsky肉湯)Radix stephaniae tetrandrae防已染料法PCR鑒定試劑盒    250g

Catechu兒茶染料法PCR鑒定試劑盒1 g1周DMF?20°C干燥避光保存12個(gè)月

Rhizoma pinelliae preparatum法半夏染料法PCR鑒定試劑盒  1 g1周DMF?20°C干燥避光保存12個(gè)月

Folium sennae 番瀉葉染料法PCR鑒定試劑盒    1 g1周DMF?20°C干燥避光保存12個(gè)月

Radix saposhnikoviae防風(fēng)染料法PCR鑒定試劑盒   5 mg現(xiàn)貨DMSO?20°C干燥避光保存12個(gè)月用于標(biāo)記蛋白、多肽及抗體,溶于DMF及DMSO

Radix stephaniae tetrandrae防已染料法PCR鑒定試劑盒    25 mg現(xiàn)貨DMSO?20°C干燥避光保存12個(gè)月用于標(biāo)記蛋白、多肽及抗體,溶于DMF及DMSO

聯(lián)系方式
公司名稱 上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
聯(lián)系賣家 陳麗
電話 萨萬萦-营萬萩萪萨萩营萬
手機(jī) 萦营萨萨萨萨萦萭萪萭萫
地址 上海市閔行區(qū)