客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱：Histoplasma capsulatum var. farciminosum

貨號(hào)：BJP63703

分類：熒光定量PCR試劑盒

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法

可進(jìn)行相對(duì)，絕對(duì)定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL

酶混合物 1 μL N×1 μL

總量 15 μL N×15μL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

腦膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)核酸檢測(cè)試劑盒)MAML1 (D3E9) Rabbit mAb100 ug

肺炎鏈球菌(SP)核酸檢測(cè)試劑盒)Phospho-Stat3 (Tyr705) Blocking Peptide100 ul

雙歧桿菌(BD)核酸檢測(cè)試劑盒)Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb (Alexa Fluor? 555 Conjugate)100 ul

百日咳桿菌(BP)核酸檢測(cè)試劑盒)Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP? Rabbit mAb (APC Conjugate)100 ul

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測(cè)試劑盒)XPD (D3Z6I) Rabbit mAb100 ug

腸集聚性大腸桿菌(EAEC)核酸檢測(cè)試劑盒)Human IL-4 Neutralizing (D20H1) Rabbit mAb100 ul

腸侵襲性大腸桿菌（EIEC）核酸檢測(cè)試劑盒)LIN28B (D4H1) Rabbit mAb100 ul

肉毒桿菌A型（CB-A）核酸檢測(cè)試劑盒）BRM (D9E8B) XP? Rabbit mAb20 ul
莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種探針法熒光定量PCR試劑盒戶需求包裝！ 用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等 熔點(diǎn): 補(bǔ)充中 溶解性: 可溶于熱甲醇、DMSO等溶劑，不溶于石油醚、氯仿等低極性溶劑。 提取來源: 松科 植 物 金 錢 松 pseudolarix amabilis ( Nelsn ) Regd. [ p. kaempferi Gor d]的根皮和近根樹皮 藥理藥效: 抗真菌、消炎、抗腫瘤。 鑒別方法: NMR; MS

石吊蘭甲素 英文名稱 Lysionotin 分 子 量： 344 CAS NO.： 152743-19-6 純 度： ≥98% 分子式： C18H16O7 性狀: 黃色晶體 規(guī)格: 10mg/20mg/50mg，可按客戶需求包裝！ 用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等 熔點(diǎn): 195～196℃ 溶解性: 溶于5%Na2CO3,KOH或NaOH溶液.略溶于氯仿,微溶于甲醇、乙醇及乙酸乙酯,極微溶于乙醚,不溶于水。 提取來源: 唇形科植物羅勒(Ocimum basilicumL.) 藥理藥效: 淋巴結(jié)核、肺結(jié)核、骨結(jié)核的輔助治療，也可用于支氣管炎。 鑒別方法: NMR; MS

白頭翁皂苷B 英文名稱 Pulchinenoside B 分 子 量： 1074 CAS NO.： 135247-95-9 純 度： ≥98% 分子式： C53H86O22 性狀: 白色晶體 規(guī)格: 10mg/20mg/50mg，可按客戶需求包裝！ 用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等 熔點(diǎn): 補(bǔ)充中 溶解性: 可溶于甲醇、乙腈、乙醇等溶劑，不溶于石油醚。 提取來源: 毛莨科植物白頭翁Pulsatilla 

操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。