凋亡檢測試劑盒

Annexin V-FITC/PI 凋亡檢測試劑盒是一種采用Annexin V-FITC 與 PI 雙染法進行細胞早期凋亡分析的檢測試劑盒。

細胞凋亡早期改變發(fā)生在細胞膜表面，這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸（PS）從細胞膜內轉移到細胞膜外，使 PS 暴露在細胞膜外表面。PS 是一種帶負電荷的磷脂，正常主要存在于細胞膜的內面，在細胞發(fā)生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使 PS 暴露在細胞膜外。Annexin V 具有易于結合到磷脂類如PS 的特性，對 PS 有高度的親和性。因此，該蛋白可充當一敏感的探針檢測暴露在細胞膜表面的 PS。PS 轉移到細胞膜外不是凋亡所獨特的，也可發(fā)生在細胞壞死中。兩種細胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細胞膜是完好的，而細胞壞死在其早期階段細胞膜的完整性就被破壞。另外一種活細胞非透過性熒光染料碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）不能通過完整的活細胞，但能夠對壞死和凋亡晚期的細胞進行染色，因此通常將Annexin V與PI配合染色，以區(qū)別凋亡早期細胞與壞死細胞和凋亡的晚期細胞。

白質的磷酸化狀態(tài)。適用于Western Blot和免疫共沉淀檢測磷酸化蛋白質、蛋白激酶活性測定等。

質控血清的制備：

1、收集新鮮的無溶血、無黃疸、無細菌污染的陽性血清。

2、56℃加熱10小時來活。

3、離心或過濾除去沉淀。

4、用10%的小牛血清或正常人血清（PBS緩沖液）將收集的血清稀釋至所需的濃度。

5、抽濾除菌，按一次使用的量分裝小安瓿，封口，20℃保存?zhèn)溆?，不可反復凍融，被檢物要求檢出的水平常被認為是質控血清應選擇的水平。

6、標定含量，20-30次測定結果刪除>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值，并與已知定值血清對比測定。

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