一步法大提質(zhì)粒DNAout

產(chǎn)品及特點(diǎn)

本產(chǎn)品是在分枝桿菌DNAOUT（CAT#:70702）基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式升級(jí) 產(chǎn)品，具有下列特點(diǎn)：從水體中提取高純度的基因組DNA是水體環(huán)境監(jiān)測(cè)非常重要的手段，但是由于水 體樣品存在腐殖酸、金屬離子等PCR抑制劑，從水樣中提取DNA一直比較棘手。為 解決此問題，本公司利用在核酸純化領(lǐng)域的豐富經(jīng)驗(yàn)和先進(jìn)的純化技術(shù)開發(fā)了本產(chǎn) 品，它具有下列特點(diǎn)：本產(chǎn)品是整合土壤DNAOUT（CAT#：60701）和柱式腐殖酸清除劑 （CAT#：60801）兩個(gè)產(chǎn)品而得的柱式升級(jí)產(chǎn)品，它結(jié)合了兩者的優(yōu)點(diǎn)，專門用 于從各種土壤樣品和河海沉積物中提取高質(zhì)量的DNA的試劑。本產(chǎn)品是在天凈沙細(xì)菌DNAOUT基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式升級(jí)產(chǎn)品，可以用 于絕大多數(shù)革氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌基因組DNA的快速提取。本產(chǎn)品是在一步裂解式質(zhì)粒DNAOUT（CAT#：70903）基礎(chǔ)上開發(fā)的、 能夠快速?gòu)?00 mL左右的E.coli培養(yǎng)液中取質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它只需要一種溶液即 可以完成細(xì)菌裂解，并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。它比經(jīng)典的堿變性質(zhì) 粒制備方法更加快捷和方便。本產(chǎn)品的主要特點(diǎn)是： 1. 快速，整個(gè)質(zhì)粒DNA提取過程只需要不到30分鐘，比傳統(tǒng)的堿變性方法快捷。
2. 超螺旋比例高，獨(dú)創(chuàng)的非堿法一步式細(xì)菌裂解技術(shù)，避免了強(qiáng)堿對(duì)DNA的損 害，得到的質(zhì)粒DNA切口更少。
3. DNA純度高，幾乎沒有基因組DNA和RNA污染，OD260/280一般在1.7-1.9 之間。
4. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細(xì)菌轉(zhuǎn)化、分子克隆等實(shí)驗(yàn)。
5. 大吸附量為600 mg DNA，具體產(chǎn)率取決于質(zhì)?？截悢?shù)。
6. 過程簡(jiǎn)單，重復(fù)性和穩(wěn)定性好。
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大紙盒包裝 
溶液 A LM70903a 70 mL 大離心吸附柱 LM90303 5 套 專用洗柱液 LM70903b 50 mL×2 DNA 洗脫液 2.0 111205 10 mL 使用手冊(cè) 71101sc 1 份

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存（溶液 A 需要 4℃保存），有效期一年。 

自備試劑 無

使用方法 1. 用 50 mL 離心管分?jǐn)?shù)次收集 10-60 mL 新鮮的菌液，一般可以 5000 rpm離心 10 分鐘，去除上清即得細(xì)菌沉淀。

2. 往細(xì)菌沉淀中加入 14 mL 溶液 A，充分振蕩懸浮或吹打混勻。注意：充分重懸細(xì)胞沉淀（無塊狀物）對(duì)于獲得高的質(zhì)粒產(chǎn)量十分重要。

3. 將裂解液全部轉(zhuǎn)移到大離心吸附柱中，放入到配套的收集管中。

4. 6000 rpm 離心 5-10 分鐘，棄穿透液。離心過濾柱將吸附溶液中的質(zhì)粒DNA，而將基因組 DNA 和雜質(zhì)在穿透液中。如果離心吸附柱中還有未離心下去的裂解液，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間直到離心吸附柱中沒有殘留液體。

5. 將 10mL 通用預(yù)洗液加入到離心吸附柱中，室溫靜置 2 分鐘后 6000 rpm離心 5 分鐘，棄穿透液。

6. 重復(fù)上步一次。

7. 將 10mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中，室溫靜置 2 分鐘后 6000 rpm離心 5 分鐘，棄穿透液。

8. 重復(fù)上步一次。

9. 室溫 6000 rpm 空甩 5 分鐘，棄穿透液。注意：此步很重要，不能跳過。

10.將離心吸附柱放入一個(gè)自備的、干凈的 50 mL 塑料離心管中，加 1 mL 通用洗脫液（洗脫液如加熱到 50-65℃效果更佳），室溫靜置 2 分鐘后 6000rpm 離心 5 分鐘，收集液即是質(zhì)粒 DNA 溶液。

11.重復(fù)上步 1 次以便洗脫更多的質(zhì)粒 DNA。

12.合并所得質(zhì)粒 DNA，立即使用或-20℃儲(chǔ)存