蛋白膠中量回收試劑盒

產(chǎn)品及特點(diǎn)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）不僅可用于檢測(cè)蛋 白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量，而且也是分離純化蛋白質(zhì)的重要工具之一，隨著蛋白 質(zhì)技術(shù)的微量化，有必要從凝膠中回收蛋白質(zhì)以用于制備抗體、免疫印跡、 氨基酸組分分析或末端序列測(cè)定等。本產(chǎn)品就是專門為此用途開發(fā)的微量蛋 白膠回收法，它具有下列特點(diǎn)： 1. 簡(jiǎn)單，不需要復(fù)雜而昂貴的儀器（如電洗脫儀）。

2. 適用于變性膠（SDS-PAGE）和非變性膠。

3. 回收率一般在 50-90%之間（跟蛋白質(zhì)大小，洗脫時(shí)間相關(guān)）。

4. 跟后續(xù)的實(shí)驗(yàn)兼容，包括 2-D 電泳、質(zhì)譜測(cè)序等。
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大扁盒包裝
蛋白膠中量純化溶液 A LM90403a 5 mL
蛋白膠中量純化溶液 B LM90403b 50 mL
20mL 塑料注射器 LM90403c 5 只
使用手冊(cè) LM90403sc 1 份

運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

自備試劑 無(wú) 

使用方法

1. 按常規(guī)方法進(jìn)行變性（SDS-PAGE）或非變性蛋白電泳。

2. 切取含目的蛋白的膠（盡可能地把多余的膠切除，否則會(huì)影響回收效率）。 注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建議把樣品分多孔上樣，電 泳后只切其中一個(gè)樣孔的膠條進(jìn)行固定和染色，然后將此膠條放回到在整 體膠中原來(lái)的位置，通過顯色膠條上的蛋白條帶找到在未染色膠上對(duì)應(yīng)區(qū) 域，并切下此區(qū)域的膠進(jìn)行回收。

3. 將切下的膠塊轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 塑料離心管中。

4. 用研磨杵充分將膠塊壓磨成盡可能細(xì)小的碎片。

5. 加入 200 uL 溶液 A，4℃搖晃洗脫至少 2-16 小時(shí)（過夜）。此時(shí)好將 溶液 B 放在冰箱預(yù)冷。

6. 10,000 g 離心 10 分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中，注意不要吸取碎膠。

7. 加入 5 倍體積的預(yù)冷的溶液 B，搖晃混勻。

8. -20℃放置至少 10-30 分鐘。

9. 室溫 12,000 g 離心 5-20 分鐘，棄上清。

10.室溫充分晾干，得到的沉淀即為回收的蛋白質(zhì)?；厥盏牡鞍踪|(zhì)可溶解在適 當(dāng)?shù)木彌_液中，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)（2-D 電泳、質(zhì)譜測(cè)序等）。