漢坦病-毒2型(HTV-2試劑盒-熒光-PCR法)
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生產商,貿易商,
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上海市奉賢區(qū)
漢坦病毒2型(HTV-2)試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢PCR主要產品之一,產品優(yōu)勢 樣品種類多,質控嚴格,高特異性,供貨快,已被國內外廣大科研工作者使用,被稱謂:質量信得過產品
通用名稱:漢坦病毒2型(HTV-2)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格:50T/盒
英文名稱:HTV-2Detection Kit (Real-Time PCR Method)
自備試劑:樣品 RNA
【檢驗原理】
本試劑盒對漢坦病毒2型(HTV-2)基因保守區(qū)設計特異性的引物和探針[1-3],用熒光 PCR 技術對核酸進行體外擴增檢測,從而達到快速檢測之目的。
漢坦病毒2型(HTV-2)試劑盒(熒光-PCR法)試劑組成】
名 稱 | 規(guī) 格 |
酶液 | 50μL×1 管 |
HTV-2反應液 | 500μL×2 管 |
HTV-2陽性質控品 | 50μl ×1 管 |
陰性質控品 | 250μl×1 管 |
【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融不超過 5 次。有效期 12 個月。
【適用儀器】
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。
【標本采集】取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g。
【保存和運輸】上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃。但不能超過 6 個月,標本運送應采用 0℃冰代。【使用方法】樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1 樣本前處理:
取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g,手術剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。
2 DNA 提取
樣本 DNA 的提取采用 DNA 提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
試劑配制(試劑準備區(qū))
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 10 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:
試劑 | HTV-2反應液 | 酶液 |
用量 | 20μL | 1μL |
將步驟 1 提取的 DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL,加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
PCR 擴增(核酸擴增區(qū))
4.1 將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;
4.2 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25ul;熒光通道選擇: 檢測通道
(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,請勿選擇 ROX 參比熒光。
4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設置: