登革熱病毒3型(DFV-III)試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢PCR主要產(chǎn)品之一，產(chǎn)品優(yōu)勢 樣品種類多，質(zhì)控嚴格，高特異性，供貨快，已被國內(nèi)外廣大科研工作者使用，被稱謂：質(zhì)量信得過產(chǎn)品
通用名稱：登革熱病毒3型(DFV-III)試劑盒(熒光-PCR法)

規(guī)格：50T/盒

英文名稱：DFV-III Detection Kit (Real-Time PCR Method)

自備試劑：樣品 RNA

【檢驗原理】

本試劑盒對登革熱病毒3型(DFV-III)基因保守區(qū)設(shè)計特異性的引物和探針[1-3]，用熒光 PCR 技術(shù)對核酸進行體外擴增檢測，從而達到快速檢測之目的。

登革熱病毒3型(DFV-III)試劑盒(熒光-PCR法)試劑組成】

名 稱	規(guī) 格
酶液	50μL×1 管
DFV-III反應(yīng)液	500μL×2 管
DFV-III陽性質(zhì)控品	50μl ×1 管
陰性質(zhì)控品	250μl×1 管

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復(fù)凍融不超過 5 次。有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標(biāo)本采集】取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g。

【保存和運輸】上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃。但不能超過 6 個月，標(biāo)本運送應(yīng)采用 0℃冰壺。【使用方法】樣品處理（樣本處理區(qū)）

1.1 樣本前處理：

取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g，手術(shù)剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中， 8000rpm 離心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。

2 DNA 提取

樣本 DNA 的提取采用 DNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照；樣品每滿 10 份，多配制 1 份)，每測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑	DFV-III 反應(yīng)液	酶液
用量	20μL	1μL

加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL，加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

PCR 擴增（核酸擴增區(qū)）

4.1 將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

4.2 設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25ul；熒光通道選擇： 檢測通道

（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）NONE，請勿選擇 ROX 參比熒光。

4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

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