一、概念

點擊化學(xué)（Click chemistry），這個概念zui早是來源于對天然產(chǎn)物和生物合成途徑的觀察。是由化學(xué)家巴里·夏普萊斯（K B Sharpless）在2001年引入的一個合成概念，是由2001年成為諾貝爾化學(xué)獎得主現(xiàn)年67歲的夏普萊斯教授，引入的一個合成概念。

“點擊化學(xué)"一般由疊氮化物（azide）和炔烴（alkyne）作用形共價鍵，具有高效穩(wěn)定，高特異性等優(yōu)點。反應(yīng)不受PH影響，能在常溫條件下的水中進行,甚至能在活細(xì)胞中進行。

二、分類：

根據(jù)引入基團的種類，點擊化學(xué)試劑可以分為以下幾種：

1.疊氮修飾試劑（非熒光疊氮化物）用途

1）AmdU（5-疊氮甲基-2'-脫氧尿苷）——是一種含有疊氮化物的核苷，可通過細(xì)胞聚合酶摻入新生DNA中。隨后可以用炔烴或環(huán)炔烴修飾以此方式連接到DNA的疊氮基團。

2）疊氮化物-PEG2-醛——具有疊氮基和脂族醛部分的連接基。

3）疊氮化物-PEG3-OH——是一種雙官能分子，具有疊氮基，伯醇和介于兩者之間的親水性連接基。

4）疊氮丁酸NHS酯——用于肽和蛋白質(zhì)的疊氮基標(biāo)記的活化酯

5）生物素PEG3疊氮化物——疊氮化生物素親和探針可利用生物素進行點擊化學(xué)標(biāo)記。

6）氯-PEG3-疊氮化物——是帶有反應(yīng)性氯化物的異雙功能連接子，用于各種親核基團的烷基化

7）碘-PEG3-疊氮化物—— 碘-PEG3-疊氮化物包含高反應(yīng)性的碘化物官能團，其可以使各種以C-，O-，N-，S-為中心的親核試劑和其他親核試劑烷基化。

2.炔基修飾試劑（非熒光炔烴）用途

1）乙炔酰肼——含有炔基和酰肼功能的雙功能試劑。它與醛和酮反應(yīng)。然后可以通過CuAAC反應(yīng)將炔基與各種疊氮化物偶聯(lián)。

2）炔烴馬來酰亞胺——用于將炔烴官能團連接到蛋白質(zhì)，肽和帶有SH（硫醇）基團的其他分子，包括半胱氨酸殘基。

3）炔烴NHS酯（己酸NHS酯）——炔烴NHS酯用于帶有炔基的生物分子標(biāo)記，用于銅催化的Click化學(xué)。

4）生物素炔烴——是一種反應(yīng)性親和標(biāo)記，可以通過點擊化學(xué)（Click Chemistry）附著到生物分子上。

5）DBCO NHS酯——偶氮苯并環(huán)辛炔（DBCO，ADIBO）試劑，用于應(yīng)變促進的無銅Click化學(xué)（spAAC）。該試劑具有NHS酯功能，可將環(huán)辛炔連接到各種分子上。

6）EdU（5-乙炔基-2'-脫氧尿苷）——是一種核苷，可通過細(xì)胞酶摻入復(fù)制的DNA中。之后，可以通過與熒光染料疊氮化物的點擊化學(xué)反應(yīng)來開發(fā)細(xì)胞中包含的DNA，從而揭示細(xì)胞增殖。

7）己酸STP酯——炔基活化酯，用于修飾氨基。STP酯基是NHS酯官能團的絕佳替代品。

8）戊酸STP酯——一種用于將炔烴引入肽/蛋白質(zhì)的活化酯。

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