碘化丙啶(PI)染色液為Annexin V鑒定凋亡和壞死細(xì)胞輔助試劑。
      碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可與雙鏈DNA特異性結(jié)合，并產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光，正常情況下無法透過細(xì)胞膜。由于凋亡晚期或壞死細(xì)胞膜喪失完整性，PI可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)對DNA進(jìn)行染色，與Annexin V搭配使用，可區(qū)分處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞。
      本試劑搭配Annexin V-FITC檢測喜樹堿誘導(dǎo)的Jurkat細(xì)胞凋亡效果如下圖所示：

實(shí)驗(yàn)操作指南步驟：
      1. 細(xì)胞按照實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行凋亡誘導(dǎo)，300g離心5min，棄上清，收集細(xì)胞，PBS洗滌一次，輕輕重懸細(xì)胞并計(jì)數(shù)。
      注：本品僅在懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞中驗(yàn)證，良好的細(xì)胞狀態(tài)是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。貼壁生長的細(xì)胞用于凋亡檢測時(shí)，可能會(huì)因?yàn)橐让赶?、吹打等處理?dǎo)致細(xì)胞的壞死或凋亡，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能存在不可控的影響，請謹(jǐn)慎處理。
      2. 取1-5×10^5重懸的細(xì)胞，300g離心5min，棄上清。用PBS洗滌細(xì)胞一次，離心后棄上清，加入500μL稀釋的1×Annexin V Binding Buffer工作液重懸細(xì)胞。
      3. 細(xì)胞懸液中加入5μL的Annexin V-熒光染色液和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
      4. 輕柔渦旋混勻后，室溫避光孵育15-20min。
      5. 反應(yīng)完成后立即上機(jī)檢測。如不能及時(shí)檢測，請于冰上避光靜置并于1小時(shí)內(nèi)完成檢測。

保存條件：
     4℃可保存1年；碘化丙啶(PI)染色液需要避光保存。

注意事項(xiàng)：
     1. 為獲得最佳的使用效果，請?jiān)?-6個(gè)月內(nèi)使用；
     2. 染色后宜盡快檢測，時(shí)間過長可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加；
     3. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，操作和存放過程盡量注意避光保存；
     4. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
 
(本試劑產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療)

Procell凋亡試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢

• 1、多種標(biāo)記物（FITC、PE、APC、AF647/PI、7-AAD）選擇，滿足不同待測樣本和檢測儀器的需求；
• 2、多種試劑盒相關(guān)組分在售，靈活滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求；
• 3、檢測早期凋亡最理想的方法，不需固定環(huán)節(jié)從而避免相關(guān)的假陽性；
• 4、只需15-20分鐘，簡單快捷；
• 5、嚴(yán)格可靠的質(zhì)量控制，保證優(yōu)異的實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
• 6、專業(yè)的售前售后技術(shù)支持，幫助您更好完成凋亡實(shí)驗(yàn)。

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