產(chǎn)品名稱：豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)

檢測(cè)方法： 實(shí)時(shí)熒光 PCR

規(guī)    格： 50T

保存方式： 2~8℃

有 效 期： 1年

產(chǎn)    地： 中國(guó)

用    途： 僅用于科研實(shí)驗(yàn)

訂購(gòu)流程:豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)

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ELISA常見(jiàn)問(wèn)題：豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)

利用ELISA進(jìn)行檢驗(yàn)常見(jiàn)的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。

1、抗原：ELISA抗原有三類：液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。

純度不高可導(dǎo)致試劑盒的特異性不強(qiáng)，合成抗原一般都是多肽抗原，

試劑盒一般為基因重組抗原?？乖兌炔桓?，特異性就不強(qiáng)，

2、抗體特異性和親和力的大小會(huì)影響試劑盒的特異性和敏感性

3、酶結(jié)合物，試劑盒的保存時(shí)間通常由酶的穩(wěn)定性決定。

最常用的就是辣根過(guò)氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。

ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液（PBS）

堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了，因?yàn)闅埩舻腜BS會(huì)抑制一半的酶活性。

TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(yīng)（OPD對(duì)機(jī)體有突變作用，所以改用TMB）

豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1. 當(dāng)檢測(cè)樣本中被檢核酸濃度低于本試劑盒的*檢出限時(shí)可能會(huì)發(fā)生假陰性的結(jié)果。

2. 被檢樣本在采集、運(yùn)輸、儲(chǔ)存以及處理過(guò)程中操作方式不當(dāng)容易造成RNA降解而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

3. 樣本在采集、運(yùn)輸、儲(chǔ)存以及處理過(guò)程中發(fā)生交叉污染，則容易得到假陽(yáng)性結(jié)果。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 產(chǎn)品的*檢出限為10² Copies/mL，產(chǎn)品CV值≤5%。

【注意事項(xiàng)】

所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；
試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化，混勻并短暫離心；
反應(yīng)液應(yīng)避光保存；
反應(yīng)中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；
使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；
樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行，以免交叉污染；
實(shí)驗(yàn)完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器；
試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待，并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。.

實(shí)驗(yàn)操作

1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動(dòng)物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過(guò)程詳見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進(jìn)行）
剪下所需測(cè)試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開(kāi)封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序?yàn)?/span>NG、待測(cè)樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)（擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團(tuán)選擇FAM，淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。

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