上海滬崢生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對照品, PCR檢測試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細(xì)胞
轉(zhuǎn)基因植物Cry1A(c)基因檢測試劑盒(PCR法)
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上海市奉賢區(qū)
主營產(chǎn)品
ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對照品, PCR檢測試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:轉(zhuǎn)基因植物Cry1A(c)基因核酸檢測試劑盒(PCR法)
檢測方法: 實(shí)時(shí)熒光 PCR
規(guī) 格: 50T
保存方式: 2~8℃
有 效 期: 1年
產(chǎn) 地: 中國
用 途: 僅用于科研實(shí)驗(yàn)
訂購流程:轉(zhuǎn)基因植物Cry1A(c)基因核酸檢測試劑盒(PCR法)
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3.訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五17:00之前。
4.如因單位財(cái)務(wù)制度原因,可申請先發(fā)貨,報(bào)賬后付款(此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好的 客戶)。
ELISA常見問題:轉(zhuǎn)基因植物Cry1A(c)基因核酸檢測試劑盒(PCR法)
利用ELISA進(jìn)行檢驗(yàn)常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原:ELISA抗原有三類:液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。
純度不高可導(dǎo)致試劑盒的特異性不強(qiáng),合成抗原一般都是多肽抗原,
試劑盒一般為基因重組抗原。抗原純度不高,特異性就不強(qiáng),
2、抗體特異性和親和力的大小會(huì)影響試劑盒的特異性和敏感性
3、酶結(jié)合物,試劑盒的保存時(shí)間通常由酶的穩(wěn)定性決定。
最常用的就是辣根過氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液(PBS)
堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了,因?yàn)闅埩舻腜BS會(huì)抑制一半的酶活性。
TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(yīng)(OPD對機(jī)體有突變作用,所以改用TMB)
轉(zhuǎn)基因植物Cry1A(c)基因核酸檢測試劑盒(PCR法)
設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)(30 uL 體系)
在PCR 管中加入下列成分:
成份 |
樣品 |
陽性對照 |
陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer, 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補(bǔ)超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機(jī),按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。
轉(zhuǎn)基因植物Cry1A(c)基因核酸檢測試劑盒(PCR法)電泳檢測RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的PCR 產(chǎn)物長度為 286 bp。
實(shí)驗(yàn)操作
1.模板制備(樣本制備區(qū))
建議使用配套水生動(dòng)物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板(模板添加區(qū),放置于冰盒上進(jìn)行)
剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管,放置在室溫待解凍后,離心30秒后揭開封口膜,向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板,順序?yàn)?/span>NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后,渦旋混勻30s,離心1min,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
3. 擴(kuò)增反應(yīng)(擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū))
使用熒光定量PCR儀,熒光基團(tuán)選擇FAM,淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。