DNA-瓊脂糖凝膠

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200401131333	DNA-瓊脂糖凝膠			詢價	咨詢客服	3天

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性 狀：	DNA-瓊脂糖凝膠FF是一種將變性小牛胸腺DNA鍵合在瓊脂糖微球上形成的親和層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了天然多糖化合物極好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，具有高動態(tài)吸附容量，快流速操作等特點，適用于與DNA相結(jié)合的DNA聚合酶、RNA聚合酶、DNA酶、核酸外切酶等的分離純化
質(zhì)量標準：	1. 裝柱 1.1 根據(jù)分離目標性質(zhì)配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。 1.2 將所取凝膠抽干，用初始緩沖液（按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例）配成勻漿并脫氣。 1.3 底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。 1.4 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，沉降過夜。 1.5 連結(jié)好柱子頂端活動柱頭，打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積，再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積，調(diào)節(jié)適配柱頭，使其盡量貼近膠面，最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。 注意：所有操作過程不能引入氣泡，保證裝膠的均勻度。 2. 平衡 將平衡緩沖液以操作流速平衡，觀察檢測器的變化，直到電導(dǎo)、pH等參數(shù)不變。平衡緩沖液根據(jù)目標物性質(zhì)和pH要求可選擇Tris-鹽酸、PBS、檸檬酸-檸檬酸鈉、醋酸-醋酸鈉等緩沖液。 3. 上樣 切換轉(zhuǎn)換閥進行上樣，上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進行選擇，也可進行線性實驗找到最佳上樣量；樣品的預(yù)處理：用平衡液配制，0.45mm微孔濾膜過濾。 4. 沖洗 用2-3個柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的，觀察檢測器的變化，直到電導(dǎo)、pH等參數(shù)不變，此時未吸附的組分被清洗出去。 5. 洗脫 DNA-瓊脂糖凝膠FF的洗脫可用鹽溶液進行恒定洗脫、梯度洗脫或者階躍洗脫，一般推薦增大鹽濃度的梯度洗脫進行。 6. 再生 用高鹽濃度的緩沖液（含1-2mol/LNaCl）按操作流速沖洗3-5個柱體積，接著用平衡液洗到平衡3-5個柱體積。 若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。 7. 在位清洗(CIP) 對于強結(jié)合蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)，可采用以下流程進行在位清洗：0.1mol/LNaOH洗2個柱體積，6mol/L鹽酸胍洗2個柱體積，0.1mol/L磷酸洗2個柱體積，平衡緩沖液洗2個柱體積。 在位清洗可有效去除介質(zhì)上的雜質(zhì)，同時介質(zhì)上的熱源也可基本去除。 親和（affinity chromatography）是一種吸附，配體（或配基）和相應(yīng)的配基（或配體）發(fā)生特異性結(jié)合，而這種結(jié)合在一定的條件下又是可逆的。所以將配體（或配基）固相化后，就可以使存在液相中的相應(yīng)配基（或配體）選擇性地結(jié)合在固相載體上，借以與液相中的其他蛋白質(zhì)分開，達到分離提純的目的。親和具有高效、快速、簡便等優(yōu)點。
貯 存：	1. 包裝：聚胺酯瓶密封包裝，規(guī)格為5毫升、25毫升、100毫升、250毫升和1升。 2. 貯存：20%乙醇，4°C冰箱保存。 3. 運輸：4°C、常壓、避光。 4. 保質(zhì)期：5-10年。