魚源性成分(Fish)檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
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上海市奉賢區(qū)
產(chǎn)品名稱魚源性成分(Fish)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
包裝:48T
分類:pcr-熒光試劑盒
用途:本產(chǎn)品僅供科研與實驗使用,不用于臨床診斷等
目的:本試劑盒適用于檢測疑似感染者或發(fā)病動物等組織、體液或淋巴結(jié)等標本中禽流感病毒rna,用于禽流感病毒感染的輔助診斷,其檢測結(jié)果僅供參考。
魚源性成分(Fish)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
魚源性成分(Fish)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 在PCR 管中加入下列成分:
成份 |
樣品 |
陽性對照 |
陰性對照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer, 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對 | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無 | 2 uL |
EMCV 陽性對照 | 無 | 2 uL | 無 |
補超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無 |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機,按下面參數(shù)進行 RT-PCR。
魚源性成分(Fish)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 電泳檢測RT-PCR 產(chǎn)物。預期的PCR 產(chǎn)物長度為為 286 bp
魚源性成分(Fish)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 【參考值(參考范圍)】
1.試劑盒有效性判定:
(1)陽性對照:有典型S型擴增曲線或Ct值≤35。
(2)陰性對照:Ct值>38或無Ct值,線形為直線或輕微斜線,無指數(shù)增長期。
2.標本結(jié)果判定:
(1)陽性:標本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期。
(2)可疑:標本檢測結(jié)果Ct值在35~38范圍內(nèi)。此時應對標本進行重復檢測,如重復實驗結(jié)果Ct值仍在35~38范圍內(nèi),有明顯指數(shù)增長期,則判定為陽性,否則為陰性。
(3)陰性:標本檢測結(jié)果Ct值>38或無Ct值。