豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒的原理：

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。ELISA試劑盒在測定時(shí)，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體。

ELISA試劑盒樣本收集以及處理方法：

液體類標(biāo)本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
A、檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/ 分）。仔細(xì)收集上清。
B、檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5）組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒標(biāo)本的稀釋原則：
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。*計(jì)算濃度時(shí)，稀釋了“N”倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

【生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則】
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

【實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)】

一、標(biāo)本收集體積 100μl 。當(dāng)天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)標(biāo)本儲(chǔ)存在4℃備用。標(biāo)本2-8℃可以保存48小時(shí)；-20℃可以保存1個(gè)月，-70℃可以保存309個(gè)月。標(biāo)本避免反復(fù)凍融。
二、血清標(biāo)本采集避免溶血。紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放具有過氧化物酶活性物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
三、標(biāo)本宜在新鮮時(shí)代測。保存時(shí)間過長的樣本可能發(fā)生聚合，ELISA實(shí)驗(yàn)中會(huì)使本底加深。
四、反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低，樣本可以少量分裝保存或者適當(dāng)加入防腐劑。
五、如果您在購買我們公司試劑盒后操作中遇到任何特殊問題，敬請咨詢我司。
ELISA檢測范圍準(zhǔn)確，質(zhì)量可靠，靈敏度高，產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)操作簡.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,*限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi).

購買豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒常見問題：
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豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒新產(chǎn)品：

大鼠軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒    Rat   Netrin-1,Ntn1 ELISA試劑盒    

大鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒    Rat   Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA試劑盒    

大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒    Rat   anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA試劑盒    

大鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒     Rat   C-telopeptide of type Ⅰ   collagen,CTX-Ⅰ ELISA試劑盒    

大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒    Rat   phospho-inhibitory subunit of NF-κBα,pIKBα ELISA試劑盒    

大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒    Rat   Nuclear factor-kappa B,NF-κB   ELISA試劑盒    

大鼠樹突狀細(xì)胞表面特異性C型凝集素-細(xì)胞間黏附分子3結(jié)合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)    Rat   DC specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing   nonintegrin,DC-SIGN/CD209 ELISA試劑盒    

大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒    Rat   procollagen Ⅰ N-terminal   peptide,PⅠNP ELISA試劑盒    

大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒     Rat   A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA試劑盒    

大鼠c-fos ELISA試劑盒    Rat   c-fos ELISA試劑盒    

大鼠c-jun ELISA試劑盒     Rat   c-jun ELISA試劑盒    

大鼠可溶性白介素6受體(sIL-6R)ELISA試劑盒    Rat   soluble In